产品详情
文献和实验
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保存条件 :-20℃保存
保质期 :有效期1年
英文名 :Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody
库存 :大量
供应商 :翌圣生物科技(上海)股份有限公司
CAS号 :点击查看
规格 :300 T
产品信息产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody 兔免疫组化(IHC)检测试剂盒 |
36312ES75 | 300 T | 1186 |
产品描述
翌圣IHC Kit for Rabbit Primary Antibody可用于检测以兔单克隆或多克隆抗体为一抗的免疫组化实验,检测原理基于高特异性高亲和力的链霉亲和素-生物素结合:已固定或培养细胞的抗原与一抗形成抗原抗体复合物,生物素化二抗特异性结合上述复合物,经辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素特异性识别生物素(即抗原所在位置),最后经辣根过氧化物酶底物显色即可检测相应抗原。
本品可适用于多种类型样本,如石蜡包埋切片、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本等。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 |
36312-A | Normal goat serum for IHC 封闭液 | 7.5 mL x 2 |
36312-B | Biotin-conjugated Anti-Rabbit IgG 生物素标记抗兔二抗 | 7.5 mL x 2 |
36312-C | HRP-conjugated Streptavidin HRP 标记链霉亲和素 | 7.5 mL x 2 |
36312-D | 20×DAB Substrate Buffer 20×DAB底物缓冲液 | 800 µL |
36312-E | 1×DAB Stock Solution 1×DAB浓缩液 | 16 mL |
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存,有效期1年。勿冰冻!
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)DAB是一潜在致癌物,使用时请注意自我防护。
3)检测样本时需同时做阴性对照和阳性对照。
准备试剂
1)二甲苯、乙醇、甲醇
2)去离子水
3)30%过氧化氢溶液
4)1×PBS,PH 7.4
5)苏木素染色液(Cat#60502)
6)封片剂(Cat#36313)
使用方法
1. 样品准备
染色前用PBS浸泡组织或细胞涂片10 min。石蜡切片于室温下用二甲苯常规脱蜡、入水、抗原修复。
【注】从此步骤起,严禁标本或组织切片干燥。
2. 染色(以石蜡切片为例)
1)将处理好的石蜡切片放入3% H2O2-甲醇溶液中浸泡10 min,以消除内源性过氧化氢酶的作用。
2)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。
3)封闭:加一滴封闭液于组织切片上(需完全覆盖待检组织)孵育10 min。
4)倒掉或吸干液体(不要冲洗)。
5)一抗孵育:每张切片加2滴(100 µL)或适量一抗(需完全覆盖待检组织),湿盒内孵育30-60 min。
6)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。
7)二抗孵育:每张切片加一滴生物素标记抗兔二抗(需完全覆盖待检组织),孵育10 min。
8)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。
9)酶孵育:每张切片加一滴HRP标记链霉亲和素(需完全覆盖待检组织),孵育10 min。
10)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。
11)制备DAB显色液。
按照底物缓冲液和浓缩液1:20的比例进行配制显色液,以1张切片为例,分别吸取试剂D、E溶液2.5 µL和50 µL充分混匀即可
【注】① DAB显色液需现配现用,避光放置,且在30 min内使用。
② 可根据需要一次染多张切片,各种试剂量按照上述比例放大即可。
12)显色:向切片上滴加一滴上述DAB显色液,室温显色2-5 min(此步可在显微镜下控制显色程度)。
13)自来水充分冲洗。
14)用合适复染剂复染,盐酸酒精分化。
15)继续后续脱水、透明、封片、镜检。
3 . 结果判定
阳性结果处显处染棕黄或棕褐色。
HB190522
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
品牌商实名认证
钻石会员
入驻年限:17年