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文献和实验
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供应商 :上海笃玛生物科技有限公司
检测限 :电询
检测方法 :ELISA
应用 :电询
适应物种 :人
标记物 :电询
样本 :血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等
规格 :48T/96T
实验原理
1. 抗体或抗原的吸附:将待测抗原或抗体吸附到固相载体上,常用的载体有微孔板、玻璃纤维、聚苯乙烯等。这些载体表面具有特殊的化学基团,能够与待测抗原或抗体特异性结合。
2. 酶标记的抗体或抗原的结合:将酶标记的抗体或抗原与待测抗原或抗体结合,形成酶标记的抗原-抗体复合物。酶标记的抗体或抗原具有高度的特异性和亲和力,能够与待测抗原或抗体形成稳定的复合物。
3. 底物显色反应:当酶标记的抗原-抗体复合物与底物溶液接触时,酶能够催化底物分解,产生颜色变化。通过测量颜色的变化程度,可以判断待测抗原或抗体的浓度。
试剂盒组成
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体 | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
准备工作
1.孔板室温平衡1小时
2.做好布板图谱
3.样本解冻
4.准备各型号的移液枪、枪头、量筒
5.准备双蒸水
6.根据样本量配好样本xi释液
7.根据样本量及洗板次数配好洗液
8.若需要提前设置好振板器、洗板器
9.准备足够量的擦手纸
10.根据说明书提示,溶解标准品
11.配制不同浓度的标准品
12.配制质控品
13.根据预实验结果稀释样本
14.准备好封板膜
实验步骤
1. 准备试剂盒:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟以上,使试剂盒恢复至室温。
2. 加样:分别向各孔中加入标准品、待测样本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板胶纸封住反应孔,轻轻振荡混匀,37℃孵育1小时。
4. 洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液充分洗涤4-5次,每次30秒。
5. 加酶标二抗:每孔加入50μl酶标二抗溶液,轻轻振荡混匀,37℃孵育30分钟。
6. 洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液充分洗涤4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,轻轻振荡混匀,37℃孵育15-20分钟。
8. 终止反应:每孔加入50μl终止液,轻轻振荡混匀。
9. 读数:用酶标仪在450nm波长处读取各孔的光密度值。
结果分析
根据试剂盒提供的标准品浓度及对应的OD值,利用标准品绘制的标准曲线,计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理,通过计算得到待测样品的浓度。
产品包装:盒装
性状:瓶装液体
规格:96T/48T
保存条件:2-8℃
保存期限:6个月
运输条件:2-8℃低温运输,用干冰或者生物冰袋低温运输。
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