研选大肠杆菌表达系统（重组蛋白表达）

服务名称 ：大肠杆菌表达系统表达重组蛋白

提供商 ：普健生物

规格 ：重组蛋白定制服务

　　服务简介：

　　大肠杆菌表达系统具有遗传背景清晰，培养周期短，易于放大生产，抗污染能力强等诸多优点，是目前应用最为广泛的表达系统之一。普健生物经过十多年的打磨，建立了3H(High through、High efficiency、High quality) 大肠杆菌表达系统，平台的表达成功率大于95%;独有的表达纯化以及复性平台，已成功交付上万例大肠杆菌表达服务项目。

　　服务优势：

　　1. 普健生物具有十几年的蛋白表达经验，15台中大型微生物培养摇床及发酵设备、12台超声破碎仪、中试型高压均质仪等配套设备，可以实现高通量，大规模大肠杆菌表达生产

　　2. 具有多种大肠杆菌表达载体pET系列、pGEX系列等;多种表达宿主：标准表达菌株、可增强蛋白表达的菌株T7E、表达毒性蛋白的C41、增强蛋白可溶性表达的超低温菌株Arctic、以及其它经过AtaGenix优化改造的菌株;通过不同载体和菌株的优化组合，可以实现蛋白的高效表达，蛋白表达成功率超过95%

　　3. 普健生物具有完善的大肠杆菌表达、纯化、内毒素控制生产线，可以生产高质量蛋白，用于细胞活性实验，动物实验等，满足高质量的蛋白使用需求

　　

 

　　服务流程

　　案例展示

　　以蛋白A为例：

　　1.优化表达体系，包括宿主菌、诱导温度、诱导时间、诱导剂的浓度及培养基。
 

宿主菌	诱导温度	诱导时间	诱导剂	培养基
T7E,BL21,C41,Arctic	30℃/37℃	1h/4h	IPTG	LB/自诱导培养基

 

 

　　摇瓶的表达量为8mg/L, 随后进行了发酵条件的优化，包括培养基成分的优化、分批及补料的测试，70L 分批发酵的表达量为60mg/L

　　2.纯化结束用3C酶去除蛋白上的MAT标签，具体结果如图3、图4所示

　　

 

　　普健生物(武汉)科技有限公司于2012年在武汉成立，作为武汉国家生物产业基地指定的光谷抗体发现与筛选公共服务平台，具备优越的技术实力和国际化发展的战略格局，专注于重组蛋白、抗体、诊断原料、抗体药物发现等自主技术平台的建设和下游生物医药产品的战略合作。

　　

 

　　公司大楼坐落于东湖新技术开发区神墩四路, 这里绿叶繁茂，道路宽敞，周围有一众生物科技型高新企业。普健生物作为一员加入此处，为周遭增添了一抹亮丽的色彩。

　　

 

　　公司立足于生命科学领域，自主建立三大完善的技术服务平台：生命科学研究平台、诊断原料开发平台、抗体药物研发平台。生命科学平台：拥有五大成熟高效的蛋白表达系统(枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞)，鼠/兔单克隆抗体平台，可提供蛋白表达、分子构建-蛋白表达纯化-结构解析、抗体重组表达、鼠/兔单克隆抗体制备以及相关检测服务。诊断原料开发平台：拥有开放式化学发光自动平台，可缩短研发周期、降低开发成本与技术风险，为广大客户提供各种诊断核心原料开发。抗体药物发现平台以杂交瘤筛选与噬菌体展示技术为主，目前已完成构建并对外提供抗体筛选技术服务的文库有：新冠特异性抗体噬菌体文库、羊驼天然纳米抗体噬菌体文库、兔源天然抗体噬菌体文库、小鼠天然抗体噬菌体文库。同时也开发了大量的重组蛋白、抗体、工具酶、药物对照抗体、工业酶、诊断原料等相关产品。

　　

 

　　目前已拥有的自主技术包括：哺乳动物细胞重组蛋白表达系统、稳定细胞株构建、噬菌体文库的构建以及淘选、DNA免疫技术、化学发光免疫诊断抗体筛选技术等等。截止目前已成功交付数万例与重组蛋白、抗体相关的技术委托研发，客户以及合作伙伴涵盖了国内外优秀的学术研究机构以及制药公司;并且与FIND(创新诊断基金会)、BAYER(拜耳作物科学)、广州呼吸健康研究院建立合作关系;与青岛大学附属医院医学研究转化中心，苏州系统医学研究所，广州再生医学与健康广东省实验室建立战略合作关系。