文献支持A549人肺癌细胞/ATCC细胞株/免费配带STR鉴定报告

品系 ：细胞系

ATCC Number ：100万

细胞类型 ：细胞系

肿瘤类型 ：肺癌

生长状态 ：贴壁培养

年限 ：长期

运输方式 ：冻存/复苏

器官来源 ：肺

是否是肿瘤细胞 ：肺癌

细胞形态 ：上皮细胞样

免疫类型 ：否

物种来源 ：组织

相关疾病 ：肺癌

组织来源 ：肺

注册证号 ：-

英文名 ：A549

库存 ：1*10^6

供应商 ：镜像绮点

规格 ：T25

A549人肺癌细胞/ATCC细胞株/免费配带STR鉴定报告

细胞介绍

该细胞系由D.J.Griad通过肺癌组织移植培养建系，患者为58岁白人男性。A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。

细胞特性

1） 来源：肺癌

2） 形态：上皮细胞样，多角形；贴壁生长

3） 含量：>1x10^6 细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备F-12K（推荐iCell-0007）培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二、细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

人胶质母细胞瘤细胞	A172	DMEM+10%FBS+1%P/S	贴壁生长
人横纹肌肉瘤细胞	A-204	McCoy’s 5A+10%FBS+1%P/S	贴壁生长
人黑色素瘤细胞	A2058	DMEM+10%FBS+1%P/S	贴壁生长
人卵巢癌细胞	A2780	1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S	贴壁生长
人卵巢癌细胞+GFP	A2780+GFP	1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S	贴壁生长
人T淋巴细胞白血病细胞	A3	1640+10%FBS+1%P/S	悬浮生长
人恶性黑色素瘤细胞	A375	DMEM+10%FBS+1%丙TONG酸钠+1%L-谷氨酰胺+1%P/S	贴壁生长
人恶性黑色素瘤细胞+EGFP	A375+EGFP	DMEM+10%FBS+1%丙TONG酸钠+1%L-谷氨酰胺+1%P/S	贴壁生长
人表皮癌细胞	A431(A-431)	DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙TONG酸钠+1%P/S	贴壁生长
人肾癌细胞	A498	MEM+10%FBS+1%P/S	贴壁生长
人肺癌细胞	A549	F12K+10%FBS+1%P/S	贴壁生长