UCF.ME® 全能核酸酶(UltraNuclease)

UCF.ME® 全能核酸酶(UltraNuclease)

价格: ¥418

品牌:翌圣生物(Yeasen) 品牌认证

货号:20156ES25

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产品详情

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保存条件 :-15℃ ~ -25℃保存

保质期 :有效期2年

英文名 :UCF.ME® UltraNuclease

库存 :大量

供应商 :翌圣生物科技(上海)股份有限公司

CAS号 :点击查看

规格 :25KU

产品信息
产品名称 产品编号 规格 储存 价格
UCF·ME UltraNuclease全能核酸酶 20156ES25 25 KU -20℃ 418.00
20156ES50 50 KU -20℃ 768.00
20156ES60 100 KU -20℃ 1398.00

产品描述

UltraNuclease(全能核酸酶),又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X-100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解各种形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNA和RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。

本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化,纯度≥ 99%,可用于科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究,并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。

本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl pH 8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50% Glycerol)中,无色透明液体。

产品性质

来源

E. coli

分子量(Molecular Weight)

26.5 kDa

等电点

6.85

纯度(Purity)

≥ 99%(HPLC)

酶活(Enzyme Activity)

250-300 U/μL

比活(Specific Activity)

≥ 1.5×106 U/mg蛋白

最适pH(Optimum pH)

8.0(工作范围pH 6-10)

最适温度(Optimum Temperature)

37℃(工作范围0-42℃)

辅助因子(Cofactor)

1-10 mM Mg2+

储存缓冲液(Storage Buffer)

20 mM Tris-HCl pH8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50% Glycerol

活性单位定义(Unit Definition)

在37℃,pH 8.0反应条件下,2.625 mL反应体系中,在30 min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。

运输和保存方法

干冰运输。-15℃ ~ -25℃保存,有效期2年。

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

推荐使用条件

条件参数

最佳条件

有效条件

Mg2+

1-5 mM

1-10 mM

pH

8-9

6-10

温度

37℃

0-42℃

DTT

0-100 mM

>0 mM

巯基乙醇

0-100 mM

>0 mM

单价阳离子

0-20 mM

0-150 mM

磷酸根离子

0-10 mM

0-100 mM

在最佳条件下推荐使用量及处理时间(37℃,2 mM Mg2+,pH 8.0

UltraNuclease用量(终浓度)

处理时间

0.25 U/mL

> 10 h

2.5 U/mL

> 4 h

25 U/mL

30 min

使用方法

1、 样本准备

贴壁细胞:去除培养基,用PBS清洗细胞,去除上清。

悬浮细胞:离心收集细胞,用PBS清洗细胞,6,000 rpm 离心10 min,收集沉淀。

大肠杆菌:离心收集菌体,用PBS清洗1次,8,000 rpm 离心5 min,收集沉淀。

2、样品处理

将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比1:(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g细胞约为109个)。

3、酶的添加

1)添加适量MgCl2将反应体系中的Mg2+ 浓度调整在1-5 mM范围内,将pH调整成8-9。

2)按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加UltraNuclease,37℃孵育30min以上。也可以跟据上表中的推荐使用量自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。

【注】全能核酸酶的酶活受离子浓度、反应温度及pH等因素的影响,初次使用时建议摸索最适浓度。

4、上清获取

以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清,再进行后续相关实验。

【注】若溶液为高盐溶液,偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。

HB220729


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