第一链cDNA合成技术服务

提供商 ：上海达为科生物科技有限公司

服务名称 ：第一链cDNA合成技术服务

第一链cDNA合成技术服务

第一链cDNA合成试剂盒采用莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV），优化反应Buffer，使反应的模板量（Total RNA）可在0.2-2μg范围之间进行逆转录反应。cDNA合成后进行PCR扩增既可检测到长cDNA（>10kb）片段，也可检测到低丰度cDNA样品。本试剂盒提供了由TotalRNA或mRNA合成cDNA第一链所需要的全部试剂，合成的第一链cDNA可广泛用于2ndStrand的合成、杂交、PCR扩增、Real-Time PCR反应等。

第一链cDNA合成试剂盒的主要特点：

产品名称	描述	规格	货号
第一链cDNA合成试剂盒 RT EasyTM（For first-strand cDNA synthesis）	用于长cDNA合成或者客户特定引物RT反应	25 rxns	JRD RT-01011
		100 rxns	JRD RT-01012

实时PCR实验具体方法

1.SYBRGreen法：

在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

SYBR定量PCR扩增荧光曲线图

PCR产物熔解曲线图（单一峰图表明PCR扩增产物的单一性）

2.TaqMan探针法：

探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。

二、服务流程
1、引物设计与合成
2、DNA/RNA抽提
3、反转录（针对RNA）
4、上机定量分析
三、客户提供
1、全血、组织或细胞。
2、引物，或由丰核提供。
3、基因信息：目的基因名称、物种和序列（或GenBank Accession Number）。
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