重组人源血管内皮生长因子亲和琼脂糖凝胶（rh-VEGF NUPharose）

保存条件 ：20%乙醇，2~8℃保存

保质期 ：5年

英文名 ：Recombinant Human VEGF NUPharose，

库存 ：10000

供应商 ：杭州纽龙生物科技有限公司

规格 ：1ml

品 名：重组人源血管内皮生长因子亲和琼脂糖凝胶（Recombinant Human VEGF NUPharose，rh-VEGF NUPharose）
目 录 号：NRPB03L、NRPB03S
规 格：25 ml，1 ml预装柱，5 ml预装柱
贮 存：20%乙醇，2~8℃保存。
运 输：2~25℃、常压、避光。
保 质 期：5年。
相关介绍：
血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）又称血管通透因子（Vascular permeability factor，VPF），是胎儿和成人血管发生和血管生成过程中重要的调控因子，在增强血管的渗透性、诱导血管发生和血管生成及内皮细胞生长、促进细胞迁移、抑制细胞凋亡等方面发挥作用。
VEGF的表达水平和肿瘤内的血管生长情况呈正相关，并且和肿瘤的转移风险呈正相关，抑制VEGF信号转导可以抑制多种肿瘤的发生和发展。将rh-VEGF165偶联到琼脂凝胶填料制备成的rh-VEGF165亲和琼脂糖凝胶填料预装柱可用于筛选能够同VEGF165相互作用的化合物。
技术指标：

基质	6%高度偶联的琼脂糖凝胶
配基	rh-VEGF165
配基密度	0.25~1.0 mg/ml
填料粒径	45~165 μm
最大流速	750 cm/h
推荐流速	100 cm/h
工作（清洗）pH值	3~9（3~10）
耐反压	0.3 MPa
保存条件	+2~8℃保存于20%乙醇溶液中

应用举例：捕捉与VEGF165相互作用的分子
结合缓冲液：20 mM磷酸缓冲液，150 mM NaCl，pH 7.4
洗脱缓冲液I：0.1M柠檬酸缓冲液，pH 6.0
洗脱缓冲液II：0.1M甘氨酸缓冲液，pH 2.7
中和缓冲液：1 M Tris-HCl，pH 9.0
以上缓冲液需要用户自己准备！

1. 5 ml rh-VEGF165亲和琼脂糖凝胶预装柱用5~10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液；
2. 用结合缓冲液平衡 5~10个柱床体积；
3. 3~5 ml 目的样品经0.45 μm滤膜过滤后加载上柱；
4. 用结合缓冲液冲洗 5~10个柱床体积；
5. 用洗脱缓冲液I和洗脱缓冲液II先后洗脱10个柱床体积；
6. 自2/3柱床体积处开始收集1个柱床体积的洗脱液，并用中和缓冲液调节其pH至中性；
7. TLC双向扩散层析（图1）分析捕捉到的与VEGF165相互作用的分子。

图1、rh-VEGF165亲和琼脂糖凝胶捕捉同VEGF165相互作用的分子的TLC双向扩散层析
（茚三酮染色）

注意事项：

1. 预填柱使用简易方便，在没有仪器设备的条件下也可以完成纯化任务；
2. 样品洗脱后一般pH很低，应立刻用碱性中和缓冲液（如1 M Tris-HCl，pH 9.0）将收集到的洗脱液中和到中性，或在收集容器中事先装5%~10%、pH 9.0的缓冲液（如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸缓冲液），以利于维持目标分子的生物活性，避免目标分子失活；
3. 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，如果已经产生气泡，可以自行重装柱子；
4. 通常使用后应用4个柱床体积的0.1 M甘氨酸- HCl（pH 2.7）做再生处理，然而长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命，每使用5次再生1次即可。
5. 本产品使用10次后最好先用20%乙醇洗5个柱床体积，然后再用70%乙醇洗脱5~10个柱床体积，可洗脱脂类和疏水性较强的蛋白质，恢复柱子的载量和流速。