黄嘌呤氧化酶测定试剂盒说明书

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品牌: 钰博生物

货号: YB-60002

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检测限 : 见说明书

检测方法 : 酶联免疫

应用 : 科研

样本 : 血清/组织/尿液

库存 : 1000

供应商 : 钰博生物

规格 :96t/48t

黄嘌呤氧化酶测定试剂盒说明书
XOD(HY-60002)KIT
一、 测定意义
黄嘌呤氧化酶主要存在与哺乳动物的乳汁及肝脾中,属需要脱氢酶类,是体内核酸代谢中的重要酶,在肝细胞损伤时,此酶早于SGPT释放于血清中,并且升高明显,其对鉴别肝细胞性黄有明显的意义,并且在缺氧过程中黄嘌呤脱氢酶很快形成黄嘌呤氧化酶,其对自由基的产生起了重要的作用。
二、黄嘌呤氧化酶测定试剂盒说明书 测试原理:
XOD可催化次黄嘌呤生成黄嘌呤,与此同时产生超氧阴离子自由基,当有电子受体及显色剂存在的情况下,生成紫红色结合物,根据后者生成量的多少可以推算出XOD的活力。
三、试剂组成与配制(50T)
试剂一:液体,20ml,3瓶,-20℃以下保存,尽量避免反复冻溶
试剂二:液体,5ml,1瓶 4℃保存
试剂三:液体,6ml ,2瓶 4℃避光保存
试剂四:粉剂,2支,稀释液0.6ml*2支,-20℃以下保存,尽量避免反复冻溶
试剂五:60ml终止液,1瓶 4℃保存
四、 操作步骤:
1. 样本前处理:
(1) 血清(浆)的测定:血清可直接取样进行检测;血浆需以3000-3500转/分,离心10分钟,小心吸取澄清的上清进行检测。若仍有浑浊可反复离心。
(2) 红细胞的测定:抗凝全血以1000转/分,离心10分钟,弃上清,取下层红细胞加双蒸水按1:49的比例制成溶血待测,配好的溶血液最好当天做检测,4℃存放时间不超过8小时。
(3) 组织的测定:组织称重按重量/体积比加9倍的生理盐水制成10%的匀浆,2000转/分,离心10分钟取上清待测。
操作表:

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空白管 测定管
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蒸馏水ml a* --
样品ml -- b*
试剂一ml 1 1
试剂二ml 0.05 0.05
试剂三ml 0.2 0.2
试剂四ml 0.02 0.02
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混匀,37℃水浴20分钟

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试剂五ml 1.0 1.0
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混匀,530nm,1cm光径,蒸馏水调零,测各管吸光度值。

注:a*为蒸馏水量。B*为取样量,a与b在数值上相等。
五、黄嘌呤氧化酶测定试剂盒说明书参考取样量
血清:100ml;1:49溶血液50ml;10%肝组织匀浆25ul-100ul
六、计算公式
1. 血清XOD活力(U/L)=(测定管OD值-空白管OD值)/呈色物摩尔消光系数×(反应液总体积/取样量)×(1/光径×反应时间)
2. 溶血液XOD活力(U/gHb)=(测定OD值-空白管OD值)/呈色物摩尔消光系数×(反应液总体积/取样量)×(1/光径×反应时间)÷血红蛋白含量(gHb/L)
3. 组织XOD活力(U/gprot)=(测定OD值-空白管OD值)/呈色物摩尔消光系数×(反应液总体积/取样量)×(1/光径×反应时间)÷匀浆蛋白含量(gprot/L)
七、黄嘌呤氧化酶测定试剂盒说明书注意点:
1.试剂一、试剂四放-20℃保存,尽量避免反复冻融。
2.组织块要用生理盐水漂洗后,滤纸吸干,称重后0℃以下可保存3个月以上。
3.血浆中XOD的检测:血浆在检测过程中容易引起混浊,需在测试前以3000-3500转/分,离心10分钟,小心吸取澄清的上清,弃去上层的脂肪与下层沉淀,若仍有混浊可反复离心。

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