荧光原位杂交 FISH

服务名称 ：荧光原位杂交 FISH

提供商 ：上海麒盟生物科技有限公司

1. 技术原理

荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization， FISH）是在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合，形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列，因而可以探针直接与染色体进行杂交从而将特定的基因在染色体上定位。
FISH所用的探针大致可以分类三类：1）染色体特异重复序列探针；2）全染色体或染色体区域特异性探针；3）特异性位置探针。根据所用探针和靶核酸的不同，可分为DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类。探针的荧光素标记可以采用直接和间接标记的方法。间接标记是采用生物素标记DNA探针，杂交之后用藕联有荧光素亲和素或者链霉亲和素进行检测，同时还可以利用亲和素-生物素-荧光素复合物，将荧光信号进行放大，从而可以检测500bp的片段，比直接标记法灵敏度高很多。

1. 技术应用

FISH能在成分复杂的组织中进行单一细胞的研究而不受组织成分的影响，因此对于那些细胞数量少且散在于其他组织中的细胞内DNA或RNA研究更为方便；同时由于它不需要从组织中提取核酸，对于组织中含量极低的靶序列有极高的敏感性，并可完整地保持组织与细胞的形态，更能准确直接地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。还可用于测定组织、培养的单个细胞或细胞提取物中的核苷酸含量。

1. 服务流程

1. 客户与麒盟生物沟通，确定实验方案；
2. 麒盟生物根据客户的要求进行探针的设计和制备，或者由客户提供探针；
3. 麒盟生物开展FISH实验，并进行显微镜观察和拍照；
4. 麒盟生物提供实验结果和报告，包括具体的实验步骤和结果分析。

FISH实验示例