护骨素放免试剂盒说明书

库存 ： 大量

供应商 ： 钰博生物

检测限 ： 见说明书

检测方法 ： 酶联免疫

应用 ： 科研

标记物 ： 见说明书

样本 ： 血清/组织/尿液

护骨素放免试剂盒说明书
Osteoprotegerin（HY-J0004） RIA KIT
护骨素(0steoprotegerin，OPG) 又称为破骨细胞形成抑制因子, 是一种分泌型糖蛋白，由380个氨基酸残基组成，以生化特性相似的单体和二聚体两种存在形式。为肿瘤坏死因子受体超家族成员，它是骨代谢的一个重要调节因子。OPG主要在肺、心、肾、骨、脊髓和血管等组织表达水平较高;在骨组织,OPG 主要由成骨细胞产生;在血管系统, 主要由内皮细胞及平滑肌细胞产生，与炎症反应相关。OPG骨骼的OPG主要由OB谱系的各种细胞产生。其生物学作用主要是抑制前体破骨细胞分化、生存、融合与活化，诱导成熟破骨细胞凋亡，是一种重要的破骨细胞负性调节因子。
测定原理：本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理，125I-OPG与抗体的结合量与标准或样品中的OPG的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分(B)与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，通过数据处理可求出样品中OPG的浓度值。
药盒应用：
用于骨代谢的研究
护骨素放免试剂盒说明书药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 缓冲液（PBS）1瓶。
2、 PR分离剂（第二抗体）
3、 OPG抗体1瓶：用前充分摇匀
4、¹²⁵I- OPG标记 1瓶：
5、OPG标准品7瓶，浓度为2、4、8、16、32、64、128pmol/L
测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
OPG RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S7 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
¹²⁵I- OPG 100 100 100 100 100
———————————————————————————— 摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温15分钟， 3500 转/分 4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。
护骨素放免试剂盒说明书结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1． NSB：8%
2． 灵敏度：<0.5ug/L
3． 标准曲线范围：0~128pmol/L
4． 批内变异系数：CVw<8.4 %。
5． 批间变异系数：CVw < 10.5.5% 。
6． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
4.5±1.3pmol/L(n=25)。
本次药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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