C-反应蛋白免疫放射试剂盒操作说明书

库存 ： 大量

供应商 ： 钰博生物

检测限 ： 见说明书

检测方法 ： 酶联免疫

应用 ： 科研

标记物 ： 见说明书

样本 ： 血清/组织/尿液

C-反应蛋白免疫放射试剂盒操作说明书
CRP（HY-I0023） IRMA KIT
一、测定原理及临床意义
C-反应蛋白（CRP）是肝脏细胞合成的存在于血清、脑脊液等多种体液中的一种急性相蛋白，结合在肺炎双球菌细胞壁C-多糖体而得名。含有五个多肽链亚单位单球体，组成平面对称五边形的环状五球体，分子量为11.5-14万。文献表明：C-反应蛋白是反映机体组织炎症急性状态的一个敏感而又可考的指标。有文献报道：血浆中CRP浓度在急性炎症、创伤、感染、外科手术时迅速的增加.。最近研究表明C-反应蛋白可作为未来发生心血管疾病的一项强有力的独立预测因子，对健康人心血管病变的存在和发生心血管意外预测和预防具有重大意义。
本试剂盒采用包被珠包被抗鼠CRP单克隆抗体，它与抗原和125I标记的鼠CRP单克隆抗体反应成夹心的复合物。测定时将待测血清或标准血清和标记物（125I抗- CRP抗体）加入抗体包被珠中温育，然后弃上清，测量试管的放射性，标准或样品中的CRP浓度和放射性强度呈正相关，用各种不同浓度的CRP做标准，就可获得标准曲线，从标准曲线上可查出被测血清中的CRP含量。
二、药盒组成:
1、¹²⁵ I-CRP 一瓶。（红色溶液）
2、 包被珠（使用前用纸吸干水分后再加入试管中）一瓶.
3、 质控血清 2 瓶 （溶液） 含低、高两个剂量
4、CRP标准品7瓶：0、0.05、0.15、0.45、1.00、5.00 、10.00mg/L。
三、C-反应蛋白免疫放射试剂盒操作说明书操作方法：
1.标本的采集和处理：
（1） 待检者须空腹，静脉取血即可；
（2） 血样要及时分离血清，血清可在4℃保存2天或在 -20℃贮存2个月，应避免反复冻融。
（3） 血清标本测定前要用PBS 1：100稀释再进行测定。
2.检测方法：将圆底聚苯乙烯编号（按复管操作），按以下表程序操作。
CRP IRMA 操作程序 （单位：ul）
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试 剂 T 标准管 样 品
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标 准 品 —— 100 ——
样 品 —— —— 100
¹²⁵I- CRP 100 100 100
包 被 珠 1粒 1粒 1粒
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振荡摇匀，室温过夜或连续振荡2小时
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注：先吸去反应液，用蒸馏水或去离子水洗3—5次，每次约1ml 最后一次一定要将水吸干。将反应珠在吸水纸上吸干水分后转入干净测量管中，用γ计数器测各珠1分钟的放射性计数（CPM值）。
四、结果计算：
所有CPM值均需先减去S0的CPM值后再参加运算。
1选择γ计数器上的免疫放射程序，进行以下参数设置：
（1） S0，S1-S5，样品等管号；
（2） 结合率方式选择B；
（3） 曲线拟合方式选择：Log—Log处理；
（4） 标准浓度的设置及输入；
（5） 测定时间设置：60秒。
2也可以用计算器（CASIOfx—3600p, CASIOfx—1800p）的MODE 2 Log— Log 程序。
3还可以用手工作图：双对数直角坐标作图（横坐标为浓度，纵坐标为CPM值）
五、正常参考值：
各试验室应根据本实验室条件及接触人群的不同，做出自己的正常值。
下列正常值仅供参考：< 3mg/L
六、C-反应蛋白免疫放射试剂盒操作说明书质量参数
1、灵敏度：0.1mg/L
2、特异性：与CNP、GM-CSF、G-CSF、M-CSF、TNF等的交叉反应<5.1%。
3、精密度：批内：CV<8% 批间：<10%
4、标记物总放射性活度：50T:111 kBq/瓶，100T :222 kBq/瓶
七、注意事项：
1、使用本药盒的实验室应具有“放射性同位素使用许可证”，使用过程中产生的放射性废物应
按国家有关规定处理。
2、本药盒贮存于2~8℃,不同批号的试剂不能混用，同一批号的试剂可混匀后使用。
3、各试剂临用时先恢复至室温，必须摇匀后使用。
4、样品4℃保存2天，-20℃保存2个月，应避免反复冻融。
5、选择适当直径的试管，使反应液浸没珠子。
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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