克拉拉细胞10蛋白放免试剂盒说明书

克拉拉细胞10蛋白放免试剂盒说明书

CC10（HY-10251） RIA KIT

克拉拉细胞10蛋白（clara cell 10-kD protein，CC10）由两个 70 ~ 77 个氨基酸多肽反向平行构成的二聚体形成。其分子量由氨基酸序列决定，在 SDS 聚丙烯酰胺凝胶中具有高迁移率，分子量为 10 ~ 12 kD。CC10 蛋白存在于支气管树非纤毛、非浆液、非黏膜柱状细胞的分泌颗粒中。CC10 是Clara细胞表达分泌的一种内源性抗炎因子, 在炎性气道疾病中有保护作用。

测定原理：本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理，¹²⁵I-CC10与抗体的结合量与标准或样品中的CC10的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分(B)与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，通过数据处理可求出样品中CC10的浓度值。

药盒应用：

呼吸系统疾病的研究

克拉拉细胞10蛋白放免试剂盒说明书药盒组成：（常温运输，4℃保存）

1、 缓冲液（PBS）1瓶。

2、 PR分离剂（第二抗体）

3、 CC10抗体1瓶：用前充分摇匀

4、¹²⁵I- CC10标记 1瓶：

5、CC10标准品6瓶，浓度为2、4、8、16、32、64ng/ml

测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：

CC10 RIA加液程序 （单位： ul ）

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试 剂 T NSB S₀ S₁~S₅ 样 品

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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——

标 准 品 —— —— —— 100 ——

样 品 —— —— —— —— 100

抗 体 —— —— 100 100 100

¹²⁵I- CC10 100 100 100 100 100

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摇匀4℃ 放24小时

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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温15分钟， 3500 转/分 4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。

结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

注意事项：

本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释

本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

克拉拉细胞10蛋白放免试剂盒说明书本试剂盒主要技术指标：

1． NSB：5%

2． 灵敏度：<0.2ng/ml

3． 标准曲线范围：2~64ng/ml

4． 批内变异系数：CVw<8.0 %。

5． 批间变异系数：CVw < 11.0% 。

6． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。

11.4±5.1ng/ml(n=25)。

本次药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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