IV型胶原放免试剂盒操作说明书

IV型胶原放免试剂盒操作说明书

Ⅳ-C （HY-10086）RIA KIT

Ⅳ型胶原（Type Ⅳ Collage Ⅳ-C）是基底膜的主要成份之一，分子呈丝状，头尾分别相连形成网状结构，在血清中可出现三种主要的降解片断：长链7S、短链7S、NC1。Ⅳ-C主要由系膜细胞、内皮细胞和脏层上皮细胞、贮脂细胞产生。在正常情况下Ⅳ-C主要分布在血管、淋巴管、胆管的基底膜中，形成具有三维空间结构的胶原网，对毛细血管壁起支撑作用，缓解毛细血管内血压对管壁压迫，为基膜内其它成份提供组合支架，与Laminin及硫酸肝素多糖蛋白结合，共同维持基底膜的通透性。有文献报道：Ⅳ-C血清水平与肝纤维及肾病患者的肾小球病理改变成正相关。根据免疫竞争原理，用平衡法建立了Ⅳ-C放射免疫分析方法。

该药盒主要应用范围：

1、肝纤维化早期诊断及预后；

2、肾小球病理改变或硬化过程的评估；

3、甲亢、糖尿病、硬皮病及癌转移的机理的研究；

4、心脑血管疾病的研究。

IV型胶原放免试剂盒操作说明书 试剂盒组成：

1、Ⅳ-C标准品（液体）7瓶，浓度为0、20、40、80、160、320、640ng/mL。

2、Ⅳ-C 抗体（蓝色液体）1瓶。

3、¹²⁵I-Ⅳ-C（红色冻干品）1瓶。

4、分离剂（第二抗体）2瓶，用前充分混匀。

5、缓冲液1瓶。

样品收集：

取静脉血2ml ，注入试管中待凝固后，分离血清，-20℃保存2个月。测定前置

室温或冷水中复融，混匀后，4℃ 3000rpm/ min离心5 min，取上清测定。

测定方法：

Ⅳ-C RIA加样步骤 单位：ul

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试 剂 T NSB S₀ S₁~S₆ 样 品

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零 标 准 —— 300 200 —— ——

标 准 品 —— —— —— 200 ——

样 品 —— —— —— —— 200

抗 体 —— —— 100 100 100

¹²⁵I-Ⅳ-C 100 100 100 100 100

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充分混匀，2－8℃过夜（16－24）小时

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分 离 剂 —— 1000 1000 1000 1000

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充分混匀后，4℃放置15分钟, 3500转/分 离心15分钟,去上清，测沉淀cpm。

IV型胶原放免试剂盒操作说明书结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测物结合百分率，在半对

数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。

注意事项：

本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

本试剂盒主要技术参数：

标准曲线范围：20~640 ng/mL。

灵敏度：10ug/L。

精密度：批内CV为5%,批间CV为 10% 。

正常参考值：应用本试剂盒测定211例健康人，空腹血清IV-C浓度为

68.5 ±22.0 ng/mL。

本月药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅ S₆

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CPM

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N/T% 3.0 B₀/T% 40 B/ B₀ % 82 72 60 44 30 20

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