脂蛋白相关磷脂酶A2放免试剂盒说明书

脂蛋白相关磷脂酶A2放免试剂盒说明书

LP-PLA2（HY-10250） RIA KIT

脂蛋白相关磷脂酶A2 ( lipoprotein-associated phospholipaseA2, Lp-PLA2)又称为血小板活化因子乙酰水解酶，是磷脂酶A2超家族中独特的一组, 具有明显的底物选择性和不需要Ca²⁺ 维持其活性的特点, 能水解血小板活化因子(PAF)和氧化磷脂Sn-2位上的短链酰基,是炎症性因子。Lp-PLA₂可分为血浆型和细胞型, 细胞型的Lp-PLA2存在于细胞内, 血循环中Lp-PLA2 是血浆性Lp-PLA2, 主要由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞分泌生成 。大多数炎症性疾病时, 血清Lp-PLA2会轻度升高。Lp-PLA2水平与哮喘、动脉粥样硬化形成等疾病有关。

测定原理：本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理，¹²⁵I-LP-PLA₂与抗体的结合量与标准或样品中的LP-PLA₂的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分(B)与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，通过数据处理可求出样品中LP-PLA₂的浓度值。

药盒应用：

各种感染、炎症方面的研究

动脉粥样硬化的研究

哮喘病的研究

脂蛋白相关磷脂酶A2放免试剂盒说明书药盒组成：（常温运输，4℃保存）

1、 缓冲液（PBS）1瓶。

2、 PR分离剂（第二抗体）

3、 LP-PLA₂抗体1瓶：用前充分摇匀

4、¹²⁵I- LP-PLA₂标记 1瓶：

5、LP-PLA₂标准品6瓶，浓度为50、100、200、400、800、1600ng/ml

测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：

LP-PLA2 RIA加液程序 （单位： ul ）

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试 剂 T NSB S₀ S₁~S₅ 样 品

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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——

标 准 品 —— —— —— 100 ——

样 品 —— —— —— —— 100

抗 体 —— —— 100 100 100

¹²⁵I- LP-PLA₂ 100 100 100 100 100

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摇匀4℃ 放24小时

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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温15分钟， 3500 转/分 4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。

结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

脂蛋白相关磷脂酶A2放免试剂盒说明书注意事项：

本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释

本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

本试剂盒主要技术指标：

1． NSB：5%

2． 灵敏度：<5ng/ml

3． 标准曲线范围：50~1600ng/ml

4． 批内变异系数：CVw<8.0 %。

5． 批间变异系数：CVw < 11.0% 。

6． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。

127±73ng/ml(n=25)。

本次药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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