亮氨酸-脑啡肽放免药盒说明书

库存 ： 大量

供应商 ： 钰博生物

检测限 ： 见说明书

检测方法 ： 酶联免疫

应用 ： 科研

标记物 ： 见说明书

样本 ： 血清/组织/尿液

亮氨酸-脑啡肽放免药盒说明书
L-ENK（HY-126）RIA KIT
人亮氨酸-脑啡肽（Human Lencine-Enkephalin, L-ENK ）于1975年由Hughes发现,具有很强啊片活性,在脑内含量最高的内源性肽。在中枢神经和周围神经系统广泛存在.其生理功能:(1)参与痛觉信息调制.(2)参与免疫功能的调节.(3)参与学习记忆的调制.(4)参与精神情绪活动的调节.(5)参与应激反应并在摄食饮水心血管呼吸体温等生理活动的调节中发挥重要的作用.最近有研究发现:ENK通过非受体发挥更广泛的非功能,如通过ZETA受体调节细胞生长.
测定盒组成：
1.标准品6瓶: 10、20、40、80、160、320pg/ml (用前用标准品稀释液 1.0 ml稀释)
2. 标准品稀释液,标记稀释液各1瓶
3. L-ENK抗体 1 瓶；
4. ¹²⁵I-L-ENK 2 瓶(用标记稀释液 5.5 ml稀释)
5.免疫分离剂：1瓶；
6.质控2瓶(用前用标准品稀释液 1.0 ml稀释)
亮氨酸-脑啡肽放免药盒说明书样品准备：
本系统采用血浆标本,检测前标本推荐过C18注 (见注意事项后的样品提取).
实验步骤： L-ENK 操作步骤
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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蒸 溜 水 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
¹²⁵I- L-ENK 100 100 100 100 100
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混匀，4℃15-24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温放置30分钟后，3600 转/分 离心20分钟，去上清，测定沉淀cpm值。
亮氨酸-脑啡肽放免药盒说明书结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测物结合百分率，在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。结果为最终结果。
注意事项：
样品提取(推荐使用)：
1、取0.5ml血浆和0.5ml含1%的TFA(缓冲液A )，在4℃下3500转/分 离心20分钟，取上清。
2、在含60%乙晴溶液中加1%TFA，即为缓冲液B，将缓冲液B 3ml对Sep-Pak C18柱进行平衡，接着用缓冲液A 3ml 冲洗。
3、将1处理的上清血浆缓慢注入Sep-Pak C18柱中。
4、用缓冲液A 5ml 以1ml/2分钟速度淋洗Sep-Pak C18 柱。
5、再用缓冲液B 3ml淋洗Sep-Pak C18，速度为1ml/3分钟，并收集上述淋洗液。
6、将上述淋洗液全部分别装入10ml西林瓶中，-42℃ 冷冻干燥 ，备用。
7、取干燥后的西林瓶用500 ul 0.05M PH 7.4 PB 进行溶解，并在振荡 器上振荡3分钟。实验时取100ul进行加样。操作步骤见说明书。
8、本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
9、标本正常参考值：空腹20.5±2.25pg/ml(X±SD).正常人≤50pg∕ml
Sep-Pak C-18: Waters.inc. Massachusetts.USA TFA:SIGMA .CO .USA
药盒不提供上述二种试剂（或材料）。
本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本月药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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