胰多肽放免试剂盒操作说明书

胰多肽放免试剂盒操作说明书

PP （HY-10163） RIA KIT

胰多肽（Pancreatic Polypeptide PP）由36个氨基酸组成的直链多肽，分子量为4179.06，是由位于胰岛内PP细胞分泌。血液中PP主要来源为胰腺。PP与CCK作用相反，PP抑制胰酶分泌和胆囊收缩，可抑制胆红素排出量，对糖元分解有促进作用，并促进脂肪形成，进食引起PP释放。近来有实验证明VIP、GIP、GH等可抑制PP释放。本药盒的应用范围是：糖尿病、胰腺炎、胰腺内分泌细胞瘤、消化性溃疡、胃癌、胆石症、肝硬化、肥胖症等PP有明显变化。

药盒的组成：

1、PP标准品 1瓶，用1ml的缓冲液稀释，浓度为1pmol/ml，然后取出0.5ml

进行倍比稀释，其浓度为1、0.5、0.25、0.125、0.625pmol/ml；

2、¹²⁵I-PP 1瓶； 3、抗体1瓶；

4、缓冲液1瓶； 5、分离剂（第二抗体）1瓶；

6、EDTA.Na2 1 瓶； 7、抑肽酶 1瓶。

胰多肽放免试剂盒操作说明书 样品收集：

1、 血浆采集：

取静脉血3ml ，注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶40ul的试管中混匀，4℃ 3000rpm/ min 离心10min分离血浆，-20℃保存2个月，-70℃以下保存半年。测定前，使样本置于室温或冷水中复融，混匀后，再次4℃3000rpm/ min离心5min，取上清测定。

2、 组织样品的处理：

取出活组织，吸去血迹，称重，尽快放入1N HAC 1ml略做碾磨，然后在100℃水中煮

沸10min，匀浆。4℃3000rpm/ min离心15min。取上清-20℃以下保存，测定时用PBS

五倍以上稀释，以调节PH值。每种组织的样品非特异结合（U₀）可能有差异，每份标

本最好单独做一个U₀。取组织的重量一般在100mg左右为好。

测定方法：

PP RIA加液程序 （单位： ul ）

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试 剂 T NSB S₀ S₁~S₅ 样 品

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缓 冲 液 —— 300 200 —— ——

标 准 品 —— —— —— 200 ——

样 品 —— —— —— —— 200

抗 体 —— —— 100 100 100

¹²⁵I- PP 100 100 100 100 100

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摇匀4℃ 放72小时

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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温放置15分钟，4℃ 3500转/分 离心20 分钟，弃上清液，测定沉淀cpm数。

胰多肽放免试剂盒操作说明书 结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测样品结合百分

率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先

编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

本试剂盒主要技术指标：

1、 NSB：<5%。

1、 灵敏度：<10pmol/ml。

2、 批内变异系数：CVw<5.50 %。

3、 批间变异系数：CVw < 9.10% 。

4、 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。

注意事项：

本月药盒抗体用 ml缓冲液稀释

本月药盒标记用 ml缓冲液稀释

本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）。

本月药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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