抗利尿激素加压素放免药盒操作说明书

抗利尿激素加压素放免药盒操作说明书

AVP（HY-10074） RIA KIT

抗利尿激素加压素（ AVP）是一种由9个氨基酸组成 以二硫键构成的环状活性分子，由下丘脑视上核和室旁核合成.贮存与脑垂体后叶由压力感受器、渗透压和神经激素等刺激而释放的一种激素。其主要生物学作用：维持体液平衡、血管扩张及调节血管收缩功能。目前研究发现：体内AVP的过量分泌导致血管收缩和水钠潴留,是CHF患者并发低钠血症的病因之一.AVP在外周可通过血液循环发挥其固有的抗利尿作用,在中枢通过CSF循环影响脑的正常功能.调节颅内压和脑组织水代谢,参与体温和免疫的调节,并且与记忆和镇痛有关,对人体有多种生理作用和病理效应.。根据免疫竞争原理，用平衡法建立检测血浆AVP水平的放射免疫分析方法。

标本收集：空腹抽静脉血4ml于特凝管中（含有10%EDTA . Na2 30ul和抑肽酶40ul）,实验前标本推荐过 C18柱。

该药盒主要应用范围：

* 高血压、冠心病的研究。

* 肺心病、肾病的研究。

* 血流动力学的研究。

* AVP与其他激素关系的研究。

药盒组成：

1． AVP标记一瓶； 2.AVP抗体一瓶；

3. AVP标准品6瓶，分别为5、10、20、40、80、160pg/ml。

4． 缓冲液一瓶； 5.分离剂（第二抗体）一瓶。

抗利尿激素加压素放免药盒操作说明书操作方法：

AVP RIA 操作程序 （单位：ul）

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试 剂 T NSB S₀ 标准品 标 本

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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——

标 准 品 —— —— —— 100 ——

标 本 —— —— —— —— 100

抗 体 —— —— 100 100 100

¹²⁵I- AVP 100 100 100 100 100

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充分混匀，4℃ 24小时

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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温放置1.5小时后，3500转/分 离心 20分,去上清，测沉淀CPM值。

结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测物结合百分率，在

半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。

注意事项：

本月每瓶标准品用 ml缓冲液稀释；

本月每瓶抗体用 ml缓冲液稀释；

本月每瓶标记用 ml缓冲液稀释。

本试剂盒主要技术参数：

NSB：<5%。

灵敏度：<25pg/ml。

精密度：批内CV<4.7%,批间C< DIV>

抗利尿激素加压素放免药盒操作说明书 正常参考数据：12.16±6.5 Pg/ml

附：血浆标本过柱步骤：

1、取0.5ml血浆和0.5ml含1%的TFA(缓冲液A )，在4℃下3500转/分 离心20分钟，取上清。

2、在含60%乙晴溶液中加1%TFA，即为缓冲液B，将缓冲液B 3ml对Sep-Pak C₁₈ 柱进行平

衡，接着用缓冲液A 3ml 冲洗。

3、将1处理的上清血浆缓慢注入Sep-Pak C₁₈柱中。

4、用缓冲液A 5ml 以1ml/2分钟速度淋洗Sep-Pak C₁₈ 柱。

5、再用缓冲液B 3ml淋洗Sep-Pak C₁₈，速度为1ml/3分钟，并收集上述淋洗液。

6、将上述淋洗液全部分别装入10ml西林瓶中，-42℃ 冷冻干燥 ，备用。

7、取干燥后的西林瓶用250 ul 0.05M PH 7.4 PB 进行溶解，并在振荡器上振荡3分钟。实

验时取200ul进行加样。操作步骤见说明书。

8、结果计算：最终浓度×5.0

Sep-Pak C-18: Waters.inc. Massachusetts.USA TFA:SIGMA .CO .USA 药盒不提供上述二种试剂（或材料）。

该说明书由英国皇家医学院内分泌部《AVP药盒操作说明书》翻译而来。

Department of Endocrinology Royal Postgraduate Medical School

本次药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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