前列腺素E2放射免疫分析试剂盒使用说明

前列腺素E₂放射免疫分析试剂盒使用说明

PGE₂ (HY-10047) RIA KIT

PGE2是体内多种细胞花生四烯酸代谢产物之一，对维持细胞与组织的营养、生长及功能有重要作用，特别是在泌尿生殖系统、呼吸系统、消化系统与神经系统中PGE₂有重要的生理病理意义,为研究多种疾病的病理变化、观察临床经过及转归提供了一个新的手段。

一、原理：

抗前列腺素E₂（PGE₂）抗体与PGE₂发生特异性结合反应，形成抗原抗体复合物。在抗体不足的情况下，一定量的放射标记抗原即可推算待测样品中相应PGE₂的含量。

二、药盒组成：

1、PGE₂标准品160pg/ 0.1ml一瓶：测定时加入缓冲液倍比稀释成1.25pg/0.1ml

~80pg/0.1ml ，七个管。（PGE2 st）

2、PGE2标记物一瓶，测定时加入缓冲液10ml稀释。

3、PGE2抗体一瓶，测定时加入缓冲液9ml稀释。

4、γ—球蛋白一瓶，测定时加缓冲液21ml.

5、聚乙二醇—4000（壹袋）称重后用缓冲液配成25%浓度。

6、PGE₂缓冲液一瓶，加蒸馏水至300ml。

三、前列腺素E₂放射免疫分析试剂盒使用说明实验步骤：

PGE₂ RIA加液程序 （单位： ul ）

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试 剂 T NSB S₀ S₁~S₅ 样 品

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缓 冲 液 —— 300 300 200 300

γ—球蛋白 —— 400 400 300 200

标 准 品 —— —— —— 100 ——

样 品 —— —— —— —— 100

¹²⁵I- PGE₂ 100 100 100 100 100

抗 体 —— —— 100 100 100

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混匀，4℃过夜（或37℃ 2小时，再置4℃半小时）

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25%PEG —— 700 700 700 700

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混匀，室温放置15分钟后，3000 转/分 离心30分钟，去上清，测定沉淀cpm值。

四：计算

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测物结合百分率，在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。（此为0.1ml中PGE2的含量，换算成每1ml的含量需乘以10）。

五：前列腺素E₂放射免疫分析试剂盒使用说明注意事项：

1、试剂盒所有试剂于4℃保存。

2、如测定标本为血桨，抗凝剂为2%EDTA—Na2（含0.7NaC1），（若需可以提供）。取血的注射器与试管均用塑料试管，一次性塑料注射器，抗凝剂与血量为1：9。

3、本试剂盒适用组织及血液的测定。

4、如测定标本为活化后血小板的上清液，标本测定TXB2以前要稀释（稀释倍数取决用的血小板活化剂的种类）。

5、尿及其他液的测定：尿液需留24h尿，加入6N HCL1:9防腐。

6、组织测定：组织取下后，放入生理盐水中冲洗，吸干，制成匀浆，加入生理盐水，混匀，37F保温15分钟，离心取上清。

7、标本置于低温冰箱的有效保存期为6个月。

8、正常人血浆参考值：35.9±12pg/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对

照组。

本月药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅ S₆ S₇

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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