降钙基因相关肽放免药盒操作说明书

降钙基因相关肽放免药盒操作说明书

CGRP（HY-10045） RIA KIT

降钙素基因相关肽（Calcitonin gene related peptide CGRP）是近年来在人和哺乳动物体内发现的一种生物活性物质。CGRP广泛分布于中枢和外周神经系统以及某些器官组织中，它是目前已知最强的舒血管物质。对各系统特别是心血管系统有着重要的调节作用。

CGRP在机体病理条件下的防御和代偿意义已受到高度重视。一般认为在正常生理状态下，血浆CGRP和内皮素（ET）浓度保持相对恒定。因此，测定血浆CGRP对于研究心肌缺血、脑卒中、高血压、体外循环、血管再通以及组织移植都具有广阔的临床前景。

药盒组成：（常温运输，4℃保存）

1、 缓冲液（PBS）1瓶，用时每瓶加蒸馏水至50ml

2、PR分离剂（第二抗体）1瓶：用前充分摇匀

3、CGRP抗体1瓶。 4、¹²⁵I- CGRP 1瓶：

5、CGRP标准品6瓶，浓度为20、60、150、300、600、1200pg/ml。

样品收集：

1、血浆采集：

取静脉血3ml ，注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶10ul（含100U/ml以上）的试管中混匀，4℃3000rpm/ min离心10min分离血浆，-20℃保存2个月，-70℃以下保存 半年。测定前，使样本置于室温或冷水中复融，混匀后，再次4℃3000rpm/ min离心5min，取上清测定。

2、组织样品的处理：

取出活组织，吸去血迹，称重，尽快放入1N HAC 1ml略做碾磨，然后在100℃水中煮沸10min，匀浆。4℃3000rpm/ min离心15min，取上清-20℃以下保存，测定时用PBS五倍以上稀释，以调节PH值。每种组织的样品非特异结合（U₀）可能有差异，每份标本最好单独做一个U₀。取组织的重量一般在100mg左右为好。

降钙基因相关肽放免药盒操作说明书测定方法：（非平衡法加样）

CGRP RIA加液程序 （单位： ul ）

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试 剂 T NSB S₀ S₁~S₆ 样 品

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缓 冲 液 —— 300 200 —— ——

标 准 品 —— —— —— 200 ——

样 品 —— —— —— —— 200

抗 体 —— —— 100 100 100

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摇匀4℃ 放24小时

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¹²⁵I- CGRP 100 100 100 100 100

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摇匀4℃ 放24小时

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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温15分钟， 3500 转/分 4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。

注：测定兔标本时，应改用功25% PEG 作分离剂，每管加500ul，NSB、S₀、S₁~S₆管补加正

常人血清100ul/管（或r-球蛋白100 ul/管）；U、U₀管加PBS 100ul/管。

降钙基因相关肽放免药盒操作说明书结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

注意事项：

本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释

本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

本试剂盒主要技术指标：

1． NSB：5%。

2． 灵敏度：<15pg/ml。

3． 标准曲线范围：20~1200pg/ml。

4． 批内变异系数：CVw<7.0 %。

5． 批间变异系数：CVw < 12.0% 。

6． 特异性：本抗血清与内皮素（ET）、胃动素（MTL）、骨钙素（BGP）、C端甲状旁腺素（C-PTH）、降钙素（CT）等多肽均无交叉反应。

7． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。

50.6±24.5pg/ml(n=25)。

本次药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅ S₆

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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