脂肪炎症因子放免药盒操作说明书

脂肪炎症因子放免药盒操作说明书

Apelin（HY-100） RIA KIT

脂肪炎症因子（Apelin）是Tatemoto等于1998年首次通过反向药理学方法从牛胃的分泌物中提取并纯化的APJ的天然配体，也是由脂肪细胞分泌的一种新的脂肪细胞因子。O’Dowd等于1993年通过同源性克隆方法发现了APJ受体，即血管紧张素受体1相关的受体蛋白。Apelin是近年新发现的心血管活性肽⋯，是孤儿G蛋白偶联受体的内源性配体，广泛存在于心血管组织中，Apelin具有扩张血管、降低血压和正性肌力作用，并可能通过旁分泌和(或)自分泌方式参于心血管疾病的病理生理调节作用。apelin-APJ系统具有调节血压和体液平衡、正性肌力、改善胰岛素的敏感性等多种生物学效应．从而在心血管疾病和代谢综合征等方面发挥着重要的作用。根据免疫竞争原理，用非平衡法建立了直接检测血清Apelin水平的放射免疫分析方法。

药盒主要应用范围：

* 心血管疾病的研究

* 糖尿病研究

* 肥胖症的研究

脂肪炎症因子放免药盒操作说明书药盒组成：（常温运输，4℃保存）

1． Apelin缓冲液1瓶

2． Apelin（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。

3． Apelin标准品5瓶，浓度为0、10、20、50、100、200、400 ng/mL

4． Apelin抗体1瓶。

5． ¹²⁵I - Apelin 1瓶

测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：

Apelin RIA加液程序 （单位： ul ）

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试 剂 T NSB S₀ S₁~S₅ 样 品

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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——

标 准 品 —— —— —— 100 ——

样 品 —— —— —— —— 100

抗 体 —— —— 100 100 100

¹²⁵I-Apelin 100 100 100 100 100

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摇匀4℃ 放置24小时

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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。

脂肪炎症因子放免药盒操作说明书结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

注意事项：

本月标准品每瓶用 0.5 ml 缓冲液稀释

本月药盒抗体每瓶用 10 ml缓冲液稀释

本月药盒标记每瓶用 10.5ml ml缓冲液溶解

本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

本试剂盒主要技术指标：

1、 NSB：<5%。

2、 灵敏度：<100pg/ml。

3、 标准曲线范围：0-400ug/L

4、 批内变异系数：CVw<7.2%；

批间变异系数：CVw < 10% 。

5、 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。

44.44±9.20 ng/mL

本月药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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