英文名 :phi6 RNA Polymerase (RdRP)
库存 :大量
货号#
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规格
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价格
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库存
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#M0255L
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300 units
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4,329.00 元
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无
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#M0255S
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60 units
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1,089.00 元
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无
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♦合成用于RNAi实验的双链RNA ♦以单链RNA为模版,从3 ´端合成双链RNA ♦非引物依赖型高效合成RNA ♦使用一个9 nt的短起动序列(initiator sequence)
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概述:
phi6 RNA 聚合酶是 phi6 噬菌体 P2 蛋白经修饰后的产物,是一种 RN A 指导的 RN A 聚合酶(RdRP),可以从 3' 端开始,合成一条全长互补链,形成双链 RNA。该酶不需要任何寡核苷酸引物以启动合成。phi6 RdRP 是快速合成酶,可以单链或双链的 RNA 作为模版。模板 RNA 链最佳的起始位点需要 5' NNUUUUUUUUCC3' 序列(1-3)。
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来源:
重组E. coli菌株,含有修饰过的 phi6 噬菌体P2 蛋白基因。
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反应条件:
1X phi6 RdRP 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl(pH 8.9 @ 25 ℃),50 mM醋酸氨],加入 1.5 mMMnCl2,ATP、UTP、CTP(不随酶提供)各 0.1-0.2 mM和GTP(不随酶提供)0.3-0.6 mM,32 ℃温育。
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随酶提供:
10X phi6 RdRP 反应缓冲液 50 mM MnCl2
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质量保证:
无核酸内、外切酶和 RNase 污染,由芬兰的 Finnzymes 公司(NEB 的全球合作伙伴)纯化(专利申批中),质量控制由 Finnzymes 公司进行,NEB 公司验证。
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单位定义:
1 单位指 32 ℃条件下,20 分钟催化1 nmol的 UTP 掺入酸不溶性沉淀物中所需要的酶量。
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活性检测条件:
1X phi6 RdRP 反应缓冲液,1.5 mMMnCl2,10% DMSO,1 mM UTP,1 μg poly(rA) 及 1 μCi[3H]-UTP,30 μl 反应体系,32 ℃温育。
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浓度:
1,000 units/ml。
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贮存条件:
100 mM NaCl,50 mM Tris-HCl(pH 8.0),0.1 mM EDTA,0.1% Triton X-100 和 50% 甘油。-20 ℃贮存。
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