phi6RNA 聚合酶 (RdRP) phi6 RNA Polymerase (RdRP)

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英文名 :phi6 RNA Polymerase (RdRP)

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#M0255L
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rNTP 混合液
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每种 8 μmol . . . . . . . . . . ¥759
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合成用于RNAi实验的双链RNA
以单链RNA为模版,从3 ´端合成双链RNA
非引物依赖型高效合成RNA
使用一个9 nt的短起动序列(initiator sequence)
概述:
phi6 RNA 聚合酶是 phi6 噬菌体 P2 蛋白经修饰后的产物,是一种 RN A 指导的 RN A 聚合酶(RdRP),可以从 3' 端开始,合成一条全长互补链,形成双链 RNA。该酶不需要任何寡核苷酸引物以启动合成。phi6 RdRP 是快速合成酶,可以单链或双链的 RNA 作为模版。模板 RNA 链最佳的起始位点需要 5' NNUUUUUUUUCC3' 序列(1-3)。
来源:
重组E. coli菌株,含有修饰过的 phi6 噬菌体P2 蛋白基因。
反应条件:
1X phi6 RdRP 反应缓冲液 [50 mM Tris-HClpH 8.9 @ 25 ),50 mM醋酸氨],加入 1.5 mMMnCl2ATPUTPCTP(不随酶提供)各 0.1-0.2 mMGTP(不随酶提供)0.3-0.6 mM32 温育。
随酶提供:
10X phi6 RdRP 反应缓冲液
50 mM MnCl2
质量保证:
无核酸内、外切酶和 RNase 污染,由芬兰的 Finnzymes 公司(NEB 的全球合作伙伴)纯化(专利申批中),质量控制由 Finnzymes 公司进行,NEB 公司验证。
单位定义:
1 单位指 32 条件下,20 分钟催化1 nmol UTP 掺入酸不溶性沉淀物中所需要的酶量。
活性检测条件:
1X phi6 RdRP 反应缓冲液,1.5 mMMnCl210% DMSO1 mM UTP1 μg poly(rA) 1 μCi[3H]-UTP30 μl 反应体系,32 温育。
浓度:
1,000 units/ml
贮存条件:
100 mM NaCl50 mM Tris-HClpH 8.0),0.1 mM EDTA0.1% Triton X-100 50% 甘油。-20 贮存。

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