库存 :大量
英文名 :Bst DNA Polymerase,Full Length
货号#
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规格
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价格
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库存
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#M0328V
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250 units
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319.00 元
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无
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#M0328S
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500 units
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629.00 元
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无
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#M0328L
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2,500 units
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2,789.00 元
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无
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概述
Bst DNA 聚合酶大片段是Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的一部分,具有 5' →3' DNA 聚合酶活性,但不具有 5' →3' 外切核酸酶活性。
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来源
携带有Bacillus stearothermophilus(H. Kong)基因的E. coli菌株。
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反应缓冲液
1X ThermoPol 反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl(pH 8.8 @ 25 ℃),10 mM KCl,10 mM (NH4)2SO4,2mM MgSO4,0.1% Triton X-100]。
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单位定义
1 单位指 65 ℃条件下,30 分钟内使 10nmol 的 dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
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活性检测条件
50 mM KCl,20 mM Tris-HCl(pH8.8),10 mM MgCl2,30 nM M13mp18 ssDNA,70 nM M13 测序引物(-47)24 mer,200 μM dATP,200 μMdCTP,200 μM dGTP,100 μM [3H]-dTTP,100 μg/ml BSA 和酶。65 ℃温育。
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浓度
5,000 units/ml。
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贮存条件
50 mM KCl,10 mM Tris-HCl(pH 7.5),1 mM DTT,0.1 mM EDTA,0.1% Triton X-100 和 50% 甘油。贮存于 -20 ℃。
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热失活
80 ℃ 20 分钟。
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注意事项
Bst DNA 聚合酶不具有 3' →5' 外切酶活性。
建议反应温度不要超过 70 ℃。
Bst DNA 聚合酶不能用于热循环测序或 PCR。
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参考文献
(1) Mead, D.A. et al. (1991) BioTechniques, 11, 76–87.
(2) Aliotta, J.M. et al. (1996) Genetic Analysis, 12,185–195.
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