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文献和实验
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库存 ：大量
规格 ：50mg×5
Wako Pure System 新一代体外蛋白合成系统
WakoPURE system采用世界首创的再构成系无细胞蛋白质合成技术,对于复制、翻译及能量再生所需要的约30种因子进行调制、精制后,再加以重新构成。其中包括大肠菌的翻译因子--开始因子(IF1、IF2及IF3)、伸长因长(EF-G、EF-Tu及EF-Ts)、终结因子(RF1、RF2及RF3)、脂质体循环因子、与20种氨基酸相对应的氨基酰tRNA合成酶、甲硫氨酸酰胺tRNA转移酶、T7 RNA聚合酶等。此外,还包括脂质体、氨基酸、tRNA、能量源及能量再生系统。
对于上述构成因子(脂质体蛋白质除外),均添加了组氨酸标签。通过使用金属新和树脂,使反应所需的因子与目标蛋白质之外的构成因子相结合,再通过限外过滤即可除去树脂结合因子与脂质体蛋白质。采用这种方法,可以在短时间内得到高纯度、无标签的目标蛋白质。
【特点】
● 通过逆反应用标签系统,使蛋白质的精制变得更容易。
● 使天然序列蛋白质的精制更容易。
● 由于是重组系,因此不含有杂质蛋白质。
对于上述构成因子(脂质体蛋白质除外),均添加了组氨酸标签。通过使用金属新和树脂,使反应所需的因子与目标蛋白质之外的构成因子相结合,再通过限外过滤即可除去树脂结合因子与脂质体蛋白质。采用这种方法,可以在短时间内得到高纯度、无标签的目标蛋白质。
【特点】
● 通过逆反应用标签系统,使蛋白质的精制变得更容易。
● 使天然序列蛋白质的精制更容易。
● 由于是重组系,因此不含有杂质蛋白质。
● 从合成到精制结束只需要三个小时。
● RNase污染极少。
【扩大反应规模】
采用WakoPURE system,可以根据需要扩大反应规模。单个产品为50μl。如使用多个产品,则可以实现蛋白质的大量合成。增加反应液并不会影响合成效率。
使用试剂盒中的二氢叶酸还原酶(DHFR)对照剂,在37°C条件下进行DHFR合成反应一小时后,对每一道使用5μl。然后进行SDS-PAGE,最后用SYPRO RED进行染色。
(图谱请来电索取:13788987962 021-50272977-6221 )
(图谱请来电索取:13788987962 021-50272977-6221 )
【Q&A】
Q. 所用的模板需要什么条件?
A.WakoPURE system可用于PCR产物或者质粒。但是,模板需要具备下列序列
(亦可以是RNA)。
·开始密码子:(ATG)
·终止密码子:(TAG、TGA或TAA三者之一)
·在基因上流应有T7操纵子序列
·在开始密码子的上流约10个碱基处应有脂质体结合部位(SD序列)
·在终止密码子的下流应有6个碱基以上的序列(适用于PCR产物)
·在终止密码子的下流应有复制终止子序列(适用于质粒DNA)
Q. 蛋白质合成量有多少?
A. 最大获取量为100μg/ml。平均合成量为20~50μg。
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编号
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品名
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容量
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299-59501
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WakoPURE System （体外蛋白质合成试剂盒） |
4次用
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295-59503
|
16次用
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<四次用试剂盒>
A溶液 .................................. 25μl×4支
B溶液 .................................. 10μl×4支
DHFR对照剂 ............................ 5μl×1支
通用启发剂 .............................. 80μl×1支
手册
<十六次用试剂盒>
A溶液 .................................. 25μl×16支
B溶液 .................................. 10μl×16支
DHFR对照剂 .......................... 5μl×1支
通用启发剂 ............................. 80μl×1支
手册
| 编号 |
品名
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用途
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容量
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037-19261
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α-氰基-4-羟基肉桂酸 [CHCA]
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蛋白质组分析用
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50mg×5支
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192-13361
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芥子酸 [SA]
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蛋白质组分析用
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50mg×5支
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044-29101
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2,5-二羟基苯甲酸 [DHB]
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蛋白质组分析用
|
50mg×5支
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| 编号 |
品名
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用途
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容量
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125-05061
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赖氨酰肽链内切酶，质谱分析级
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蛋白质组分析用
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20μg×5支
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202-15951
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猪胰岛素，质谱分析级
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蛋白质组分析用
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20μg×5支
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293-57701
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阴性胶片染色剂质谱分析套装
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电泳分析用
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20次
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299-58901
|
银染试剂质谱分析套装
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电泳分析用
|
20次
|
联系人:杨树彦
手机：13788987962
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单位：上海西宝生物科技有限公司
地址：上海张江高科技园区（第一上海中心）毕升路299弄11-502
邮编：201204
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邮件：trade@cxbio.com MSN:madison03112@hotmail.com
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网址: www.seebio.cn
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