酪蛋白激酶II (CK2) Casein Kinase II (CK2)

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英文名 :(CK2) Casein Kinase II (CK2)

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蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶
人源,重组蛋白 (E. coli)
概述
酪蛋白激酶II (CK2)是具有原生型活性的丝氨酸/苏氨酸蛋白酶,由2个催化亚基(α)2个调控亚基(β)构成稳定的异源四聚体。CK2全酶会将α亚基的两个丝氨酸残基(S2/S3)自磷酸化。最近发现,CK2α亚基能在Y182上发生分子间酪氨酸-自磷酸化,这可能是一种特别的调控机制。另外,在某些特殊条件下,CK2也可以磷酸化蛋白中的酪胺酰残基。许多细胞功能中都有CK2的参与(1,2)
影响识别因素
CK2的底物特异性是不可变的,是由位于目的氨基酸(通常为Ser,极少情况下为T hr) -2+ 5之间的多个酸性氨基酸决定。虽然SXE/DS/D和这些序列的变异序列也能被磷酸化,但是通常CK2磷酸化的识别功能域为SXXE/D。多聚阴离子复合物,如肝素会抑制CK2活性,其抑制常数Ki1.4 nM (3, 4)
来源
重组E.coli菌株,携带有能同时表达CK2αβ亚基的克隆。该基因来自于人胶质母细胞瘤cDNA文库(Dr.D. Marshak惠赠) (3)
反应条件
1X CK2反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl (pH 7.5 @25°C), 50 mM KCl, 10 mM MgCl2],加入200 μM ATP和终比活性为100-500 μCi/μmol γ-放射性标记的ATP (CK2也接受GTP为磷酰基的供体来替代ATP)30°C温育。
反应缓冲液(随酶提供)
10X CK2反应缓冲液

比活性
~500,000 units/mg
分子量
α亚基(4 5 kDa )β亚基(2 5 kDa )SDS - PAGE分析的α亚基表现分子量约42 kDa
单位定义
1单位指25 μl反应体系中,30°C条件下,1分钟催化1 pmol 磷酸转移至底物RRADDSDDDDD (100 μM, NEB #P6012)所需的CK2的量(4, 5)

浓度
500,000 units/ml

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