mRNA磁性分离试剂盒 Magnetic mRNA Isolation Kit

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货号：S1550S

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英文名：Magnetic mRNA Isolation Kit

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货号#	规格	价格	库存
#S1550S	25次分离反应	3,009.00 元	无

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Oligo d(T)₂₅ 磁珠
#S1419S 25 mg ¥2,409

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6 孔磁性分离架
#S1506S 可以放 6 个管（1.5 ml） ¥1,899

12 孔磁性分离架
#S1509S 可以放 12 个管（1.5 ml） ¥3,009

♦适用自动化、高通量分离
♦无需有机溶剂
♦无需从洗脱液中沉淀 poly(A)+ 转录物
♦不到 1 小时即可获得完整 poly(A)+ RNA
♦无基因组 DNA 的污染
♦磁珠可再生

概述

NEB的mRNA磁性分离试剂盒可用于从细胞或组织中分离完整的poly(A)⁺ RNA，此过程不需要酚和其它有机溶剂。该技术的原理是将Oligod(T)₂₅与1 μm顺磁性磁珠耦合后，以此为液相支持物直接结合poly(A)⁺RNA。利用此方法可以进行多个样本的分离，也适用于自动化通高量分离。此外，磁性分离技术可得到较小体积的完整RNA洗脱液，不需要再从洗脱液中沉淀poly(A)⁺转录物，因此，分离到能够体现原始样品中mRNA分布特性的完整poly(A)⁺ RNA只需不到1小时时间。Oligod(T)₂₅磁珠可最多再生3次，实验者可选择将分离到的RNA洗脱下来或直接以结合于mRNA上的dTDNA为引物来进行cDNA第一链合成。

试剂盒成分

♦ Oligo d(T)₂₅磁珠
♦裂解/结合缓冲液
♦冲洗缓冲液I, II, III
♦洗脱缓冲液

通过以下poly(A)⁺提取实验验证了提取的RNA一致性和分离结合的一致性，并具有较宽分离范围：首先将递减的HEPG2细胞(从5 x 10⁵到1 x 10 ³)，直接在微量滴定板上进行裂解/结合，然后加入磁珠分离mRNA。使用ProtoScript第一链cDNA合成试剂盒(NEB #E6500)，以oligo(dT)为引物将mRNA的十分之一，反转录成cDNA。并使用特异引物qPCR肽基脯氨酰异构酶来检测这个低丰度的管家基因。

参考文献

(1) Wu, N. et al. (2004) Mol. Biotech., 27, 119–125.

(2) Daldoul, S. et al. (2008) Anal. Biochem., 372, 148–155.