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文献和实验
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库存 : 大量现货
供应商 : 杰辉博高
检测限 : 见说明书
检测方法 : 酶联免疫法
应用 : 仅用于科研
本试剂盒仅供研究使用。兔子皮质酮/肾上腺酮(CORT)elisa试剂盒使用目的:
本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
名称 |
96孔配置 |
48孔配置 |
备注 |
微孔酶标板 |
12孔×8条 |
12孔×4条 |
无 |
标准品(80 U/ml) |
0.5mL |
0.5mL |
按说明书进行稀释 |
标准品稀释液 |
6mL |
3mL |
按说明书进行稀释 |
样本稀释液 |
6mL |
3mL |
按说明书进行稀释 |
检测抗体-HRP |
6mL |
3mL |
无 |
20×洗涤缓冲液 |
20mL |
20mL |
按说明书进行稀释 |
底物A |
6mL |
3mL |
无 |
底物B |
6mL |
3mL |
无 |
终止液 |
6mL |
3mL |
无 |
封板膜 |
2张 |
2张 |
无 |
说明书 |
1份 |
1份 |
无 |
自封袋 |
1个 |
1个 |
无 |
注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:80、40、20、10、5、0U/ml.
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