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文献和实验
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库存 : 大量
供应商 : 上海信裕
检测方法 : 见说明
儿茶酚胺(3合1)说明书
儿茶酚胺试剂组成
提取、酰化试剂
BA1601 | 标准品A | 0ng/ml(肾上腺素);0ng/ml(去甲肾上腺素);0ng/ml(多巴胺) 1×1ml |
BA1609 | 标准品A/B | 2.5ng/ml(多巴胺) 1×1ml |
BA1602 | 标准品B | 0.9ng/ml(肾上腺素);4.5ng/ml(去甲肾上腺素);10ng/ml(多巴胺) 1×1ml |
BA1603 | 标准品C | 3ng/ml(肾上腺素);15ng/ml(去甲肾上腺素);40ng/ml(多巴胺) 1×1ml |
BA1604 | 标准品D | 9ng/ml(肾上腺素);45ng/ml(去甲肾上腺素);160ng/ml(多巴胺) 1×1ml |
BA1605 | 标准品E | 30ng/ml(肾上腺素);150ng/ml(去甲肾上腺素);640ng/ml(多巴胺) 1×1ml |
BA1606 | 标准品F | 90ng/ml(肾上腺素);450ng/ml(去甲肾上腺素);2560ng/ml(多巴胺) 1×1ml |
BA1651 | 值控1 | 1×1ml |
BA1652 | 值控2 | 1×1ml |
BA1611 | 酰化缓冲液 | 1×20ml |
BA1612 | 酰化试剂 | 1×1.5ml |
BA1613 | 化验缓冲液 | 1×4ml 包含1M盐酸 |
BA1617 | 提取缓冲液 | 1×4ml |
BA1618 | 提取盘 | 48个小孔, |
BA1619 | 盐酸 | 1×20ml(黄色)包含0.025M盐酸 |
放射免疫测定试剂
BA1614 | 铺酶 | 1×0.75ml |
BA1615 | 酶 | 2×1ml/瓶 干冻 |
BA1616 | 酶缓冲液 | 1×4ml |
BA3030 | 分离剂 | 3×55ml 使用前请充分混合 |
BA0110 | 肾上腺素抗血清 | 1×2.75ml 蓝色 |
BA0120 | 125I-肾上腺素 | 1×3ml 活性<100kbp 红色 |
BA0210 | 去甲肾上腺素抗血清 | 1×2.75ml 黄色 |
BA0220 | 125I-去甲肾上腺素 | 1×3ml活性<100kbp 红色 |
BA0310 | 多巴胺抗血清 | 1×2.75ml 绿色 |
BA0320 | 125I-多巴胺 | 1×3ml活性<100kbp 红色 |
儿茶酚胺检测程序
所有药盒中的试剂,在使用前应放置室温平衡。
8.1溶解酶的准备
重要:在每次试验前配制新的溶解酶试剂(按试验需要量配制)。把有“酶”标签的小瓶和1ml蒸馏水充分混合。将0.3ml铺酶加入到0.7ml酶缓冲液中。溶解酶的总体积为2.0ml.
8.2样本的准备、提取和酰化
所有药盒中的试剂,在使用前应放置室温平衡。每15ul标准品,值控1、2和尿液样本分别萃取。每600ul血浆样本萃取。
推荐果断的复制。
1. 吸取15ul标准品,15ul值控和15ul尿液样本分别放入各自的提取盘的小孔中。向这些容器加入500ul蒸馏水。吸取600ul血浆样本加入小孔中以便萃取肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺。(注意:应该在血浆中的多巴胺测定中,标准品要多加入标准品A/B)
2. 吸取50ul检验缓冲液加入小孔中
3. 吸取50ul提取缓冲液加入小孔中
4. 用粘性金属箔覆盖容器并等待反映30min。在室温条件下,放在震荡器上(600-900r/min)
5. 移走金属箔。立即将容器轻轻倒出并移走多余的液体。
6. 吸取150ul酰化物缓冲液加入小孔。
7. 吸取25ul酰化物试剂加入小孔。
8. 在不加入金属箔的情况下等待反应15分钟,在室温环境中并放在震荡器上(600-900r/min)
9. 立即把容器内的试剂轻轻倒出并移走多余液体(参见5)
10. 吸取1ml蒸馏水加入到小孔中
11. 在不加入金属箔的情况下等待反应15分钟,在室温环境中并放在震荡器上(600-900r/min)
12. 立即把容器内的试剂轻轻倒出并移走多余液体(参见5)
13. 吸取200ul盐酸(0.025M)加入到小孔中以便洗提儿茶酚胺。
14. 用粘性金属箔覆盖容器并等待反映10min。在室温条件下,放在震荡器上(600-900r/min)
警告:不要倒出浮在表面上的液体
用于放射免疫鉴定的洗脱液体积量:
肾上腺素
|
去甲肾上腺素
|
多巴胺
|
100ul
|
15ul
|
75ul
|
8.3肾上腺素的放射免疫鉴定
在试管(聚苯乙烯)上作标记
1. 吸取100ul盐酸加入到装有NSB的试管内
2. 吸取100ul提取标准品、值控和病人样本加入不同的试管内
3. 吸取25ul溶解酶加入到所有的试管内(除了总T管)
4. 充分混合,37℃水浴30分钟
5. 吸取50ul125I-肾上腺素标记加入到所有的试管
6. 吸取50ul肾上腺素抗血清加入到所有试管中(除了总T管和NSB)
7. 充分混合并使用离心分离机1分钟500xg
8. 在室温情况下等待反应2小时,并震荡(400-500rpm)或者在2-8℃环境中等待反应15-20小时(过夜)
9. 将充分混合冷却(2-8摄氏度)的分离剂,每根试管加入1ml分离剂(除了总T管),并混合
10. 在2-8℃环境中反应15分钟
11. 使用离心分离机工作15分钟3000xg,可能的话使用低温离心分离机。
12. 将浮在表面的液体小心的轻轻倒出或吸出(除了总试管),使试管清洁并倒立2分钟。
13. 使用√计数器将所有试管计数1分钟。
8.4去甲肾上腺素的放射免疫鉴定
在试管(聚苯乙烯)上作标记
1. 吸取15ul盐酸加入到装有NSB的试管内
2. 吸取15ul提取标准品、值控和病人样本加入不同的试管内
3. 吸取25ul溶解酶加入到所有的试管内(除了总T管)
4. 充分混合,37℃水浴30分钟
5. 萃取50ul125I-去甲肾上腺素标记加入到所有的试管
6. 吸取50ul去甲肾上腺素抗血清加入到所有试管中(除了总T管和NSB)
7. 充分混合并使用离心分离机1分钟500xg
8. 在室温情况下等待反应2小时,并震荡(400-500rpm)或者在2-8℃环境中等待反应15-20小时(过夜)
9. 充分混合冷却的试剂,每根试管加入1ml(除了总T管),并混合
10. 在2-8℃环境中反应15分钟
11. 使用离心分离机工作15分钟3000xg,可能的话使用低温离心分离机。
12. 将浮在表面的液体小心的轻轻倒出或吸出(除了总T管),使试管清洁并倒立2分钟。
13. 使用√计数器将所有试管计数1分钟。
8.5多巴胺的放射免疫鉴定
1. 吸取75ul盐酸加入到装有NSB的试管
2. 吸取75ul提取标准品、值控和病人样本加入不同的试管内
3. 吸取25ul溶解酶加入到所有的试管内(除了总T管)
4. 充分混合,37℃水浴30分钟
5. 萃取50ul125I-多巴胺标记加入到所有的试管
6. 吸取50ul多巴胺抗血清加入到所有试管中(除了总T管和NSB)
7. 充分混合并使用离心分离机1分钟500xg
8. 在室温情况下等待反应2小时,并震荡(400-500rpm)或者在2-8℃环境中等待反应15-20小时(过夜)
9. 充分混合冷却的试剂,每根试管加入1ml(除了总T管),并混合
10. 在2-8℃环境中反应15分钟
11. 使用离心分离机工作15分钟3000xg,可能的话使用低温离心分离机。
12. 将浮在表面的液体小心的轻轻倒出或吸出(除了总T管),使试管清洁并倒立2分钟。
13. 使用√计数器将所有试管计数1分钟。
参考值
以下数值仅供参考,建议实验室制定自己的正常值
|
肾上腺素
|
去甲肾上腺素
|
多巴胺
|
尿
|
<20ug/天(110nmol/天)
|
<90ug/天(535nmol/天)
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<600ug/天(3900nmol/天)
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血浆
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<100pg/ml
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<600pg/ml
|
<100pg/ml
|
儿茶酚胺灵敏度
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肾上腺素
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去甲肾上腺素
|
多巴胺
|
尿
|
0.3ng/ml
|
1.5 ng/ml
|
0.8 ng/ml
|
血浆
|
7.5 pg/ml
|
37.5 pg/ml
|
20 pg/ml
|
xyA259Bo 【中文名称】:牛膜联蛋白A5(ANXA5)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Annexin A5 (ANXA5) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA259Si 【中文名称】:猴膜联蛋白A5(ANXA5)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Annexin A5 (ANXA5) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA252Ca 【中文名称】:狗载脂蛋白C1(APOC1)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Apolipoprotein C1 (APOC1) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA263Bo 【中文名称】:牛线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Creatine Kinase, Mitochondrial 1A (CKMT1A) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA263Po 【中文名称】:猪线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Creatine Kinase, Mitochondrial 1A (CKMT1A) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA262Mu 【中文名称】:小鼠转铁蛋白受体2(TFR2)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Transferrin Receptor 2 (TFR2) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA262Ra 【中文名称】:大鼠转铁蛋白受体2(TFR2)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Transferrin Receptor 2 (TFR2) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA079Bo 【中文名称】:牛白介素6(IL6)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA079Cp 【中文名称】:羊白介素6(IL6)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA079Eq 【中文名称】:马白介素6(IL6)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) 【灵敏度】:9.375pg/mL
AEA251Rb 【中文名称】:兔抗脑组织抗体(ABAb)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Anti-Brain Tissue Antibody (ABAb) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA080Bo 【中文名称】:牛白介素8(IL8)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA080Cp 【中文名称】:羊白介素8(IL8)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) 【灵敏度】:9.375pg/mL
xyA080Eq 【中文名称】:马白介素8(IL8)ELISA试剂盒 【英文名称】:ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) 【灵敏度】:9.375pg/mL
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