Cas9酶（Cas9）

供应商 ：北京唯尚立德生物科技有限公司

浓度	1U/ul	储存	-20℃	反应条件	37℃温育
货号		规格		价格
#E025S		20U		800.00元
#E025L		100U		3200.00元

应用

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■ Cas9/gRNA特异位点体外剪切DNA，如plasmids、genomic DNA, PCR product

■ 体外检测gRNA的剪切靶点DNA的效率

■ Cas9蛋白结构与功能研究

概述

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CRISPR/Cas是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御，可特异剪切外源的病毒及DNA以对抗入侵。人工改造过的Cas9 /gRNA系统通过gRNA（short guide RNA）引导Cas9蛋白识别并剪切带有gRNA靶点的双链DNA，用于基因敲除和精确编辑DNA等操作。

来源

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重组Cas9

反应条件

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1×Buffer [20 mMHEPES，pH 7.5，150mM KCl，10 mM MgCl，0.1 mM EDTA，0.5 mM DTT]，37℃温育。

质保声明

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Cas9经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。请使用前务必仔细阅读本手册。

单位定义

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在50 μl反应体系中，37℃，gRNA足量时，1U等于1h能将1 ug 质粒或线性DNA完全酶切所需的Cas9蛋白量。

注意事项

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1.Cas9切割dsDNA效率与gRNA靶点序列有关，每个gRNA的效率都会不同。

2.所用枪头管子等都必须是RNase free的，gRNA可以适当多加，防止因为部分降解而降低酶切效率。

Cas9体外酶切法检测gRNA靶点效率实验步骤

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1.带有gRNA靶点的质粒或PCR扩增出的DNA片段，gRNA靶点最好不位于PCR片段中央，这样将切割出两条大小不同带便于判断。

2.gRNA靶点设计与体外转录准备见唯尚立德cas9/gRNA质粒构建试剂盒。

3.反应体系：

dsDNA	200 nM
gRNA（体外转录）	100 nM
Cas9	0.5-1U
10XBuffer	2ul
ddH2O	x ul
Total	20ul
充分混合后，37℃反应1h,65℃煮5min跑琼脂糖凝胶电泳检测分析酶切结果

琼脂糖凝胶电泳检测分析酶切结果。

使用限制

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本试剂仅限用于科学研究。

储存与安全

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本品4℃运输，储存于-20℃，有效期12个月。长期储存请置于-80℃。

本品采用蓝冰运输，蓝冰在使用前在-80℃冷冻至少72小时。实验证明，使用上述方法运输，即使到货时蓝冰已经融化，泡沫塑料盒中的温度仍然能保持在 4℃或4℃以下24小时。比较干冰运输的产品，其活性和稳定性无任何差异。产品纯化整个过程都在4℃进行，且其贮存液经过优化，对保持酶活的稳定性起到重 要作用。产品中含有50%甘油，可以使酶在-35℃下保持液态，若使用干冰运输，酶将被冷冻，发生反复冻融可能会导致酶活性下降。

Cas9体外酶切法检测gRNA靶点效率试剂盒

CAS9酶-使用说明