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甲状腺素放免试剂盒操作说明书

T4（HY-002） RIA KIT

甲状腺素（T4）又名一四碘甲状腺原氨酸，分子量为777。T4是甲状腺分泌的主要甲状腺激素之一，T4从甲状腺分泌到血循环后99.5%与甲状腺素结合球蛋白（TBG）、甲状腺素结合前蛋白和白蛋白等结合，其作用使激素防止由肾脏排出体外。T4与三种蛋白质结合的百分率，分别为70%、20%、10%，在血循环中只有0.05%的T4为游离状态（FT4）。T4可以经脱碘酶的作用形成生物活性更强的三碘甲状腺原氨酸（T3）。T4主要功能为调节蛋白质及脂肪的代谢，促进生长发育等。血循环中T4的水平受丘脑—垂体—甲状腺轴系统负反馈机制所调节。由于T4绝大部分与TBG等结合，血中总T4水平必然受血中TBG的影响。为了纠正TBG的影响，联合¹²⁵I-T3的摄取率测定，计算游离T4指数，将获得有意义的结果。甲状腺疾病是内分泌系统常见的疾病，总T4放射免疫测定是研究甲状腺功能最有效最常用的方法之一。

甲状腺素放免试剂盒操作说明书药盒组成：

1、 T4标记（红色）1瓶。

2、 T4 抗体1（蓝色）瓶。

3、分离剂（第二抗体）一瓶。

4、 T4标准品6瓶。其浓度分别为：0、20、40、80、160、320ng/ml(即:0、25.74、51.48、102.96、205.92、411.84)。

以上各组试剂均应摇匀使用。

甲状腺素放免试剂盒操作说明书操作方法：

1、样品处理：取晨空腹静脉采血，分离血清。（2－8）℃放置可保存7天，若冰冻保存，可放置四周。脂血或溶血样品影响测定结果。

1、实验方法：试管编号，按下表程序操作：

操作表（单位: ul）

管别	标准管	样品	抗血清	蒸馏水	¹²⁵I-T4	混匀，37℃温育1小时，任取三管测总T（CPM）	分离剂
NSB管	50（S₀）	--	--	100	200		500
S₀管	50	--	100	--	200		500
S₁-S_末管	50	--	100	--	200		500
样品管	--	50	100	--	200		500

混匀，室温放置15分钟，离心（3500转/分）15分钟，吸弃上清液，测定各管沉淀的放射性计数（CPM）。

甲状腺素放免试剂盒操作说明书数据处理：

1、计算机处理：建议函数模型采用三次多项式或log～logit法。

2、计算、绘图法：

计算各管的百分结合率：以S₀（cpm数）为B₀，各标准管S_i（cpm数）为B_i，求各管的百分结合率。

B_i B_i管（cpm）—NSB管（cpm）

— %= —————————————— ×100

B₀ B₀管（cpm）—NSB管（cpm）

（1）线性回归：用logX～logitY回归，求出r、a、b值，样品含量可由下式计算得出。

- a+logit Y

Log X= ————

b

（2）绘图法：用各标准点计算的结果，在半对数坐标纸上绘制Bi/B₀~logX标准曲线图或在log～logit坐标纸上绘制标准曲线图，未知样品浓度可根据B_i/B₀的百分结合率从标准曲线图上查出。

正常叁考值：

各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：

T4（n=150）：50～126 ng/mL (64.30~162 .2nmol / L)

技术特性：

1、曲线范围：（20～320）ng/Ml (25.74~411.84nmol / L)

2、灵敏度： < 3ng/mL(3.86nmol / L)

3、特异性：T4抗血清与T3的交叉反应合格。

4、精密度：批内CVw<10%，批间CVb<15%

5、单位换算：（nmol/L）=(ng/Ml)×1.287

保存及有效期：

药盒于（2～8）℃避光保存，切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。

药盒参考数据：

指标	B/T（%）		B_i/B₀(%)
项目	NSB	S₀	S₁	S_末
参数	<5	≥55	80	15

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