保种服务

服务名称 ：胚胎服务-2

提供商 ：北京维通达生物技术有限公司

随着转基因、基因敲除、基因导入、人源化和其他基因修饰动物的大量制作和使用，保存这些重要的动物模型需要大量的人力、财力和空间投入。

　　冷冻保存技术的出现，为科学研究者提供了不必花费昂贵代价维持动物模型核心种群的方法。冷冻保存技术还有其他许多优点，如可以避免珍贵的动物模型受到微生物污染；避免受到火灾、洪水和地震等自然灾害毁灭性的打击；更重要的是对于某些品系，可以防止伴随动物代数增加出现的基因停止或改变表达的风险。与活动物的国际运输相比，运输冻存的精子、胚胎或卵巢的成本和风险更低。

　　目前，配子冻存以精子和胚胎为主，部分冻存卵巢，较少冻存卵子，因为目前卵子解冻后复苏效率还比较低。维通达通过冻存精子，胚胎或卵巢组织，可以确保客户种质资源的安全。一旦客户需要使用冻存的种质资源，最快可以4~6周获得冷冻保存的动物资源。

服务内容和流程：

（1）胚胎冻存
　　胚胎冻存是最早的和最安全的保存实验动物品系的方法。影响胚胎冷冻保存成功的三个重要方面包括：

　　①胚胎的数量；

　　②复苏后存活胚胎的数量；

　　③胚胎移植后存活的成年动物数量。
　　

　　维通达建议客户每个品系冻存约200~300枚2cell胚胎，即8管胚胎放入液氮中保存，每管30枚胚胎。胚胎的来源，既可以通过超数排卵的方法，或者通过体外受精（IVF）的方法获得。当然，也可以与品系净化结合起来，这样可以节约获得足量数目胚胎的准备成本。

该技术的流程包括：
　　①胚胎采集。Vitalstar建议冻存2-cell胚胎。
　　②胚胎清洗。我们采用国际胚胎移植协会的建议方案进行清洗，目的是防止胚胎被微生物感染。
　　③胚胎冻存。采用玻璃化冷冻进行，经冻存液按照标准的程序处理后，投入液氮保存。
　　④复苏验证。冻存一周后，我们取出1支验证管的胚胎进行复苏，胚胎移植后检验出生小鼠的存活情况，若存活率大于50%，表明胚胎冷冻保存成功。
　　⑤长期保存。验证保存成功的品系，我们会放入专用的胚胎保存液氮罐中长期保存。

（2）精子冻存
　　精子冻存在保种服务中广泛应用，其优势在于技术成熟，成本低，容易操作等特点。通过无菌手术分离可育雄鼠的附睾，在特定的溶液进行精子的游离，采集边缘活力最好的精子，并加入专用的冷冻保护液，通过麦管冷冻保存在液氮中。
建议客户每个品系提供2~3只12周至4月龄的可育成年小鼠或大鼠，冻存10支麦管的精液。

（3）其他类型配子的冻存
　　维通达也可以提供卵巢组织切片和卵母细胞的冻存服务。由于这些技术还处于研发阶段，建议客户无法采用精子冷冻和胚胎冷冻保存时尝试使用。