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文献和实验
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服务名称 :酵母细胞蛋白表达服务
提供商 :武汉金开瑞生物工程有限公司
规格 :视具体情况而定,详情请咨询
酵母表达系统是一种最经济高效的真核蛋白表达系统,可以成功实现胞内表达或是分泌表达,且其放大培养基相对廉价,培养条件要求不高,适宜工业放大。与哺乳动物细胞表达系统一样,酵母蛋白表达系统能够对所表达蛋白进行例如糖基化、酰基化、脂基化、磷酸基化等保证蛋白天然构象的修饰,可用于制备非常接近天然蛋白的具有高附加值的蛋白原料。武汉金开瑞生物工程有限公司的酵母蛋白表达平台由多年从事酵母表达操作的实验人员组成,经验丰富,采用自行改造的高效分泌载体和宿主组合,可在很大程度上实现高质量的蛋白表达。经客户反馈,以我平台所制备的蛋白原料为抗原所制备的单抗均具有很好的识别天然蛋白的优良特性。 服务优势
1、专业技术,可以实现高效体外构建任意拷贝的基因剂量,实现表达量的提高,可成功用于工业菌种的改良优化。
2、采用自行改造的高效分泌载体:pPIC9K、pPIC9K高效融合载体、pPICZA、pGAPZa、pPaSUMO3,宿主GS115、KM71、X33的正交组合。PINK系统优化分泌表达信号肽。胞内表达采用自行改造的载体pPIC 3.5k载体和宿主GS115、KM71、X33的组合,可在最zui大程度上实现表达。
3、高效的种子筛选工作能使您所定制的蛋白在最短的时间内获得尽可能高的产量。
客户提供
目的蛋白信息或基因序列,质粒(也可以选择由金开瑞提供);
蛋白询价信息表(请点击下载中心,下载蛋白询价信息表后详细填写)。
最终交付
纯化后蛋白纯品、表达菌株(收费);
蛋白表达结题报告,包括测序报告、实验条件、蛋白表达纯化检测结果。
服务内容
服务名称 | 服务项目 | 服务内容 | 交付结果 | 服务周期 |
---|---|---|---|---|
酵母细胞表达服务经济型套餐 | 原核克隆 | 基因的获得 | 核酸电泳图片 | 2周 |
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体 | ||||
转化DH5α | ||||
重组质粒大量制备 | ||||
线性化重组质粒 | ||||
优化表达 | 电转化适宜的酵母宿主 | 酵母核酸电泳图 | 2-3周 | |
随机挑10株单菌落进行PCR鉴定 | ||||
表达及纯化 | 从PCR鉴定阳性菌落中选取一株做1L体系的放大表达 | 最终纯化产物SDS-PAGE及WB | 1-2周 | |
发酵液上清处理及一步纯化 | ||||
纯化产物SDS-PAGE及Western Blot | 1 L上清的纯化产物 | |||
酵母细胞表达服务标准型套餐 | 原核克隆 | 基因的获得 | 核酸电泳图片 | 2周 |
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体 | ||||
转化DH5α | ||||
重组质粒大量制备 | ||||
线性化重组质粒 | ||||
优化表达 | 电转化适宜的酵母宿主 | 酵母核酸电泳图 | 5-6周 | |
用遗传霉素G418进行多拷贝子筛选 | ||||
对多拷贝子克隆进行RCR鉴定 | ||||
选取40株多拷贝子进行小量诱导表达 | 最终种子表达上清SDS-PAGE图 | |||
表达及纯化 | 选取表达情况zuihaode,根据客户需要放大表达 | 最终纯化产物SDS-PAGE及WB | 1-2周 | |
发酵液上清处理及一步纯化 | ||||
纯化产物SDS-PAGE及WB | 1L上清的纯化产物 | |||
专业技术用于酵母工业菌种改良优化 | 原核克隆 | 基因的获得 | 核酸电泳图片 | 2周 |
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体 | ||||
转化DH5α | ||||
重组质粒大量制备 | ||||
专业技术体外梯度构建多拷贝基因剂量 | ||||
优化表达 | 线性化重组质粒 | 酵母核酸电泳图 | 5-6周 | |
电转化适宜的酵母宿主 | ||||
对多拷贝子克隆进行RCR鉴定 | ||||
选取40株多拷贝子进行小量诱导表达 | 最终种子表达上清SDS-PAGE图 | |||
表达及纯化 | 选取表达情况zuihaode,根据客户需要放大表达 | 最终纯化产物SDS-PAGE及WB | 1-2周 | |
发酵液上清处理及一步纯化 | ||||
纯化产物SDS-PAGE及WB | 客户要求的蛋白表达量 |
金开瑞-提供核酸和蛋白的整体研究方案:
武汉金开瑞生物工程有限公司是一家专业致力于为全球制药企业、诊断试剂企业、科研试剂研发企业、高校和科研院所以及大型医院提供蛋白及相关研究技术服务的高新技术企业。金开瑞极其注重平台技术提升,现已有多项自主知识产权和软件著作权专利,并已通过ISO9001质量管理体系认证,2018获批“千企万人”支持计划。公司以“细胞外囊泡”研究中心、基础生物医学实验中心、蛋白抗体中心和分子生物学中心为依托,提供核酸和蛋白的整体研究方案,与众多科研单位携手开展了大量的探索项目。截止到目前,已支持客户发表科研论文达1000+篇,累计影响因子6000+。
基因服务平台——引物合成、基因合成、DNA提取、载体构建、定点突变;
分子互作研究平台——双萤光素酶报告系统、RNA pull down、RIP/RIP-seq、EMSA等;
蛋白表达平台——提供从基因合成到蛋白表达的一站式服务;
抗体定制平台——单/多克隆抗体、人源化抗体、基因工程抗体、双特异性抗体、修饰抗体、诊断抗体、小分子抗体、抗体对、噬菌体服务。
更多服务内容及优惠活动,详见公司主页:http://www.genecreate.cn/
武汉金开瑞生物工程有限公司
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