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文献和实验
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全基因敲除小鼠模型定制
1、CRISPR/cas9质粒组装和活性测定。
2、原核注射。将有活性的cas9 mRNA导入到小鼠单细胞胚中。损伤后的DNA以非同源末端连接的方式进行修复,通过碱基的随机增减实现敲除该基因功能的目的。
3、流程: cas9设计-->单细胞胚胎注射-->Founder出生-->动物繁育
条件性基因敲除/基因敲入小鼠模型定制
条件性基因敲除主要是通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP和 FLP-frt来实现的。通过同源重组的方法,在目标DNA序列的两端各放置一个LoxP(或Frt)序列,得到flox(Flanked by loxP)小鼠。将flox小鼠与带有细胞特异性表达的Cre(或Flp)的小鼠杂交,从而实现特异性敲除的目的。
基因敲入是在目标基因的特定位置引入突变或外源基因,例如引入点突变,使目标基因产生的蛋白活性改变;或将报告基因例如EGFP,LacZ等通过同源重组的方式引入到目标基因的特定位点。
转基因小鼠定制
1、转基因载体设计和构建。转基因的表达区域取决于启动子。如果选择全身表达的启动子,将得到全身表达的转基因小鼠;如选择组织特异性表达的启动子,会得到组织特异性表达的转基因小鼠。在转基因片段注射到大鼠受精卵后,该片段会在大鼠基因组中进行随机插入,因而所产生的每一只Founder鼠都是不一样的,由每个Founder建立起来的品系在转基因的表达上也会有差别。
2、原核注射。将有活性的TALEN mRNA导入到大鼠单细胞胚中。TAL核酸识别模块结合到靶位点上,FokI内切酶形成二聚体,在特异位点切断目标基因,损伤后的DNA以非同源末端连接的方式进行修复,通过碱基的随机增减实现敲除该基因功能的目的。
*如在模型定制中自行构建载体,我们提供后续服务的,请您提供:
1、用于原核注射的核酸图谱
2、后代鼠的基因鉴定方案
3、用于原核注射的核酸胚胎致死的可能性
小鼠模型相关服务
1、小鼠品系引进
2、小鼠基因型,表型鉴定
3、小鼠繁育
4、小鼠胚胎冻存
服务编号 |
服务内容 |
周期* |
价格 |
SCSA210 |
全基因敲除小鼠模型定制 |
6个月 |
请询价 |
SCSA211 |
条件性基因敲除/基因敲入小鼠模型定制 |
10个月起 |
请询价 |
SCSA212 |
转基因小鼠定制 |
4个月 |
请询价 |
SCSA213 |
小鼠品系引进 |
请咨询 |
请询价 |
SCSA214 |
小鼠基因型鉴定 |
请咨询 |
请询价 |
SCSA215 |
小鼠表型分析 |
请咨询 |
请询价 |
SCSA216 |
小鼠繁育 |
请咨询 |
请询价 |
SCSA217 |
小鼠胚胎冻存 |
请咨询 |
请询价 |