文献支持稳转细胞株构建

服务名称 ：稳转细胞株构建服务

提供商 ：无锡菩禾生物医药技术有限公司

规格 ：1ml

稳转细胞株构建服务
在宿主细胞中过表达或者沉默该基因,使该基因在宿主细胞中可长时间的稳定表达,然后对目的基因进行一些列的功能研究。

稳转细胞株构建服务内容
低毒、高转染效率脂质体转染适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染；通过脂质体介导转染，将目的基因导入细胞48小时后，目的基因即在细胞内表达。此时为了建立稳定细胞系，可根据不同基因载体中所含的抗性标记，选用相应的药物对靶细胞进行筛选，从而得到稳定表达外源基因的细胞克隆。


稳转细胞株构建实验步骤
1.筛选浓度测定：前一天细胞全部死亡的抗生素浓度作为筛选浓度
2.细胞接种：转染实验前一天接种细胞（铺板密度依细胞种类而不同），使得转染当天细胞达到80%汇合
3.细胞转染
4.抗生素筛选
5.鉴定筛选结果

结果展示：






服务说明
1.含有目的基因的可直接用于转染的质粒（提供测序图谱）
2.待转染的细胞系（≥3×106个细胞，可传代，倍增时间小于48小时）
3.关于细胞培养条件的说明：本公司提供DMEM培养基，RPIM1640培养基以及G418抗生素，如需其它培养基及筛选条件，也请客户一并提供。特殊基因请客户提供相应抗体以供检测

实验完成周期及交付标准：
1.实验周期: 根据样本
2.交付标准：
1.构建好的稳定细胞系、实验报告
染适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染；通过脂质体介导转染，将目的基因导入细胞48小时后，目的基因即在细胞内表达。此时为了建立稳定细胞系，可根据不同基因载体中所含的抗性标记，选用相应的药物对靶细胞进行筛选，从而得到稳定表达外源基因的细胞克隆。

服务流程
1）筛选浓度测定：前一天细胞全部死亡的抗生素浓度作为筛选浓度
2）细胞接种：转染实验前一天接种细胞（铺板密度依细胞种类而不同），使得转染当天细胞达到80%汇合
3）细胞转染
4）抗生素筛选
5）鉴定筛选结果

服务说明
●含有目的基因的可直接用于转染的质粒（提供测序图谱）
●待转染的细胞系（≥3×106个细胞，可传代，倍增时间小于48小时）
●关于细胞培养条件的说明：本公司提供DMEM培养基，RPIM1640培养基以及G418抗生素，如需其它培养基及筛选条件，也请客户一并提供。特殊基因请客户提供相应抗体以供检测

我们提供
构建好的稳定细胞系、实验报告

质量保证
转染细胞的外源基因稳定表达

细胞平台	行为学检测	动物模型
原代细胞制备与培养	水迷宫检测	慢性胰腺炎模型
细胞培养、传代	十字架	肝纤维化模型
原代细胞传代培养		非酒精性脂肪肝
细胞系STR鉴定服务	动物模型	骨质疏松模型
细胞转染	小/大鼠饲养	糖尿病模型
MTT细胞增殖、活性、毒性检测	小/大鼠灌胃	眼外伤模型
CCK8细胞增殖、活性、毒性检测	兔子饲养费	青光眼模型
流式细胞凋亡检测	大鼠灌胃	烧烫伤模型
流式细胞周期检测	小鼠灌胃	短肠模型
血管形成实验（非钙染/钙染）	兔子灌胃	肾衰模型
ROS检测	腹腔/肌肉给药（大小鼠）	肾炎模型
划痕实验	腹腔/肌肉给药（兔子）	尿路结石
克隆形成实验	尿液/粪便采集	高氧/低氧损伤模型
粘附实验	血液采集
transwell实验（迁移）	TTC染色	病理平台
transwell实验（侵袭）	超声检测	组织包埋
贴壁/悬浮细胞转细胞株构建	血常规检测	冰冻/石蜡切片
耐药细胞株筛选构建	DR检测	HE染色
	骨组织切片	其他特殊染色
分子平台	microCT	全扫描拍照
载体构建	皮下瘤模型	扫描电镜
细胞/组织/血液RNA提取	移植瘤模型	透射电镜
mRNA/miRNA等引物设计	原位瘤模型	共聚焦拍照
RT-qPCR检测	心肌缺血再灌注模型
CHIP检测	门静脉高压动物模型
EMSA检测	高血压动物模型
双荧光素酶实验	心肌梗死动物模型
原位杂交	动脉粥样硬化动物模型
	脑缺血再灌注
免疫平台	肾性高血压模型
蛋白（核/膜/总）提取	主动脉弓狭窄模型
蛋白含量测定	脊髓损伤模型
Western Blot检测	背根神经节损伤模型
COIP	脑瘫模型
免疫组化/荧光	癫痫模型
	抑郁症模型
行为学检测	肾脏缺血再灌注模型
水迷宫检测	关节炎
十字架	肺气肿模型

六、实验服务流程



无锡菩禾生物是一家专业提供生物医药技术服务和细胞整体解决方案的高科技企业。拥有CMA 质量体系认证的实验室，5大技术平台（细胞平台、分子平台、免疫平台、病理平台、动物平台），以专业、严谨、求真、高效服务理念，为全国科研工作者提供一站式技术检测服务。
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