明胶酶谱分析

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服务名称：明胶酶谱分析

提供商：凯基生物

明胶酶谱分析

实验目的：检测各种细胞或组织提取物、培养液上清、血液或关节滑液、脑脊液等基质金属蛋白酶MMPs的活性及其抑制剂。
实验原理：以加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶分离含蛋白酶的样品，电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育，凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶条带的位置，蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮区域，能同时指示MMP-2、MMP-9的位置(酶谱)。
实验材料：
试剂：全蛋白提取试剂盒、Bradford法蛋白定量试剂盒、明胶储液、上样缓冲液（不含beta-巯基乙醇）、洗脱液、孵育液、考马斯亮蓝染液、考马斯亮蓝脱色液。
仪器：摇床、恒温箱、蛋白电泳仪。
实验内容与方法：
1、根据需要选择是否做蛋白提取步骤。
2、蛋白含量测定。
3、配胶，上样电泳，洗脱，孵育
4、考马斯亮蓝染色脱色。
客户提供实验信息：
1、实验信息（客户提供）：
样本名称与来源：样本数量：__________
检测蛋白信息：目的蛋白名称______________________
2、实验材料提供：
样本材料（客户提供，运送方法见P）：
新鲜或冷冻细胞不少于10⁶个，新鲜或冷冻组织样本不少于50 mg。
已提取的蛋白样品蛋白含量不低于0.1ug/ul。
服务周期：（2到8周，根据样本数量而定）
结果提交：提交实验报告书（包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析）、原始数据、图片，文本或电子版。

实验范例：

不同实验组细胞中MMP-9蛋白检测