蛋白免疫印迹western blotting价格

服务名称：蛋白免疫印迹western blotting

提供商：凯基生物

联系方式：025-52880813/52880839
网址：http://www.keygentec.com.cn
邮箱：service@keygentec.com.cn
地址：南京市江宁区芝兰路18号紫金方山创业特别社区6号楼
邮编：211100

蛋白免疫印迹western blotting

实验目的：检测组织或细胞中特定目的蛋白的含量。

实验原理：将蛋白样本通过聚丙烯·酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。其中的步骤包括蛋白样本提取制备，蛋白定量，电泳，转膜与显色。

实验材料：

试剂：蛋白(全/核/膜/胞浆）提取试剂盒、蛋白定量试剂盒、SDS凝胶电泳上样缓冲液、电泳缓冲液、封闭液、一抗、二抗、ECL发光液、显影液、定影液。

仪器：匀浆器、紫外分光光度计、bio-rad电泳仪、恒温箱。

实验内容与方法：

1、蛋白提取：根据需要测定的目的蛋白主要来源（胞浆、胞核或者全蛋白），区分组织提取或者细胞提取，选取相应的试剂盒。

2、蛋白定量：bradford法、BCA法或lowery法测定出所提取的蛋白含量。

3、蛋白变性：5×电泳上样缓冲液，煮沸5~10分钟。

4、凝胶电泳：垂直电泳分离出目的蛋白条带。

5、转膜：将SDS丙烯·酰胺中的蛋白通过水平电泳的方式转移到PVDF或者NC膜上。

6、免疫反应：目的蛋白分别与相应的一抗、二抗结合。

7、显色反应：通过化学发光法将蛋白条带显影至胶片上。

客户提供实验信息：

1、实验信息（客户提供）：

样本来源：细胞种属来源__________ 或组织组织来源_________

样本数量：__________ 检测蛋白信息：目的蛋白名称_______________ 蛋白分子量_________

主要表达部位（选填）_______________________ 一抗信息：抗体名称________________________ 种属来源__________

购买公司______________ 推荐工作浓度（选填）_________

2、实验材料提供：

（1）样本材料：

新鲜或冷冻细胞不少于106个，新鲜或冷冻组织样本不少于50 mg。

已提取的蛋白样品蛋白含量不低于0.1ug/ul。

（2）试剂：蛋白提取与定量可根据客户要求选用特定试剂盒，如客户不提供

试剂盒且无特别要求，则选用凯基公司相应试剂盒产品。一抗二抗反应所用抗体客户自备，凯基也可以提供抗体代订服务。

服务周期：（2到8周，根据样本数量而定）

结果提交：提交实验报告书（包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析）、原始数据、图片，文本或电子版。

实验范例：

小鼠骨骼肌组织中myoglobin蛋白电泳条带

beta-actin内参条带

灰度分析

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蛋白免疫印迹western blotting