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文献和实验
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服务名称 :免疫系统药物评价
提供商 :凯基生物
免疫系统药物评价 | |
迟发型超敏反应动物模型筛选 迟发型超敏反应(DTH)是依赖T细胞的反应,其主要特点是致敏机体在抗原攻击部位,出现迟发型炎症反应,DTH反应中的T细胞,在移植物排斥、移植物抗宿主病、自身免疫和肿瘤免疫方面起关键作用。 实验目的:通过构建迟发型超敏反应动物模型,筛选药物的细胞免疫作用强弱。 实验材料:试剂:2, 4-二硝基氯苯(DNCB)、丙·酮 器材:打孔器 动物:种系、品系:小鼠 级别:SPF级或清洁级 来源:一般来源于上海斯莱克实验动物有限责任公司,提供实验动物生产许可证原件和实验动物使用合格证复印件 实验内容与方法: 首次给药当天,各组小鼠分别用7%的2, 4-二硝基氯苯(DNCB)丙·酮溶液0.02ml/只背部皮下注射致敏。末次给药后30 min,各组小鼠右耳涂以1% DNCB麻油溶液0.03ml激发。24小时后处死动物,立即剪下左右两耳,用打孔器(直径 9mm)分别在同一部位取下圆耳片,电子天平称重,根据下公式计算小鼠耳廓肿胀度及肿胀百分率。 指标:肿胀度(g)= 小鼠右耳廓重(g)-小鼠左耳廓重(g) 肿胀百分率=肿胀度(g)/左耳廓重(g)*100% 服务周期:2周,具体情况根据客户要求 结果提交:实验报告书 溶血素抗体动物模型筛选 SRBC致敏的动物血清中存在循环抗体IgM和IgG。IgM与SRBC体外一起温育,在补体的参与下,产生溶血反应,用分光光度计测定溶血程度来反映抗体水平;IgG的检测需用抗IgG血清使IgG交联,以及用二巯基乙醇破坏IgM后,才能通过溶血程度来反映。 实验目的:通过构建溶血素抗体动物模型,筛选药物的体液免疫作用强弱。 实验材料:试剂: 绵羊血红细胞SRBC、豚鼠血清 器材:离心机、紫外分光光度计 动物:种系、品系:小鼠 级别:SPF级或清洁级 来源:一般来源于上海斯莱克实验动物有限责任公司,提供实验动物生产许可证原件和实验动物使用合格证复印件 实验内容与方法: 给药第2天,用20%SRBC腹腔注射0.2ml/只致敏。末次灌胃后24 h,小鼠眼眶取血0.5mL,常规分离血清。室温放置1h后,3000rpm离心10min。取血清,用生理盐水稀释400倍。将稀释后的血清1.5mL置试管内,一次加入10%(v/v)SRBC0.5ml,补体1mL(用生理盐水8倍稀释后)。另设不加血清的对照管(以生理盐水代替)。置37℃恒温水浴中保温30min后,冰浴终止反应。2000rpm离心5min,取上清液于540nm处以对照管做空白对照,分别测定各管OD值。 指标:溶血素的量以半数溶血值(HC50)表示,计算公式如下: HC50=样品(OD值/SRBC半数溶血时的OD)×稀释倍数 受试样品的HC50显著高于对照组的HC50时,可判定实验结果为阳性。 服务周期:3周,具体情况根据客户要求 结果提交:实验报告书 半数溶血值HC50检测 非特异性免疫动物模型筛选 实验目的:通过构建非特异性免疫动物模型,筛选药物的非特异性免疫作用强弱。 实验材料: 试剂:印度墨汁、碳酸钠 器材:离心机、紫外分光光度计 动物:种系、品系:小鼠 级别:SPF级或清洁级 来源:一般来源于上海斯莱克实验动物有限责任公司,提供实验动物生产许可证原件和实验动物使用合格证复印件 实验内容与方法: 给药后1h,尾静脉注射10%的印度墨汁0.1ml/10g,于2 min和10 min分别眼眶取血30 µl,加入盛有3 ml的0.1%碳酸钠溶液试管中,于650nm处测吸光度值OD2min和OD10min,将采完血液的小鼠处死,取肝、脾脏称重。 指标:廓清指数k及吞噬指数a 结果提交:实验报告书 服务周期:2周,具体情况根据客户要求 结 廓清指数k及吞噬指数a检测 |
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