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武汉华美生物工程有限公司蛋白平台在重组蛋白表达、纯化、包涵体复性、天然蛋白提取方面拥有完备先进的设备、丰富的经验。现已通过原核和真核表达系统、以及表达载体的优选，结合众多纯化方式获得了数十个种属的上千种高质量的重组蛋白，提取天然蛋白百余种。我们生产的众多蛋白已成功应用于蛋白结构研究、细胞功能试验、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发等众多领域，深受全世界顾客的好评。
拥有四大表达系统：
大肠杆菌表达系统：http://www.biomart.cn/infosupply/16376041.htm
——目前最常用，也是最经济实惠的蛋白表达系统，与其他表达系统相比具有遗传背景清楚，目的基因表达水平高，培养周期短，抗污染能力强等特点，是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具。
酵母表达系统： http://www.biomart.cn/infosupply/16376047.htm
——一种最经济高效的真核蛋白表达系统，可以成功实现胞内表达或是分泌表达，且其放大培养基相对廉价，培养条件要求不高，适宜工业放大。
杆状病毒-昆虫细胞表达系统：http://www.biomart.cn/infosupply/16376049.htm
——凭借其简易的流程、高表达水平及翻译后的修饰功能，可在短时间内制备大规模翻译后修饰的蛋白，被广泛应用于病毒疫苗开发（如流感病毒和HPV疫苗开发）、信号蛋白制备、细胞因子制备等。
哺乳动物细胞表达系统：http://www.biomart.cn/infosupply/16376059.htm
——能够指导蛋白的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子，在重组蛋白药物和诊断原料试剂盒的开发及应用方面倍受青睐。
更多产品请见公司主页：http://www.cusabio.cn/
详情请咨询：86-27-87582341 86-27-87196173
拥有四大表达系统：
大肠杆菌表达系统：http://www.biomart.cn/infosupply/16376041.htm
——目前最常用，也是最经济实惠的蛋白表达系统，与其他表达系统相比具有遗传背景清楚，目的基因表达水平高，培养周期短，抗污染能力强等特点，是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具。
| 实验项目 | 实验内容 | 交付结果 | 服务周期 |
| 1.质粒构建 | 包括IPTG,阿拉伯糖，热休克，冷休克诱导方式，GST，Trx，SUMO，BMP，His，HA，Flag，myc等融合标签载体的构建。 | 表达质粒 测序报告 | 1周 |
| 2.表达菌株筛选 | 将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。SDS-PAGE电泳检测，挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。可提供表达菌株：DH5α, Top10, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, Golden, Rosetta(DE3), RosettaBlue(DE3),Rosetta gami B (DE3), C41等宿主。 | 表达菌株 SDS-PAGE图谱 | 3个工作日 |
| 3.目标蛋白表达及纯化、标签切除 | 摇瓶培养2-8L重组菌，诱导表达目标蛋白。 通过亲和层析，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化目的蛋白。可根据需求切除标签，再纯化获得目标蛋白 |
大于1mg目的蛋白，纯度最少90%以上 | 2~3周 |
| 4.包涵体复性 | 蛋白诱导表达与包涵体纯化 数百种缓冲条件快速筛选最佳复性缓冲，采用稀释复性，透析复性，柱层析复性等多种技术获得纯度大于90%的包涵体。 |
大于1mg目的蛋白 | 2~3周 |
| 300L高密度发酵，大规模纯化，冻干，对外服务，2014即将启动 | |||
酵母表达系统： http://www.biomart.cn/infosupply/16376047.htm
——一种最经济高效的真核蛋白表达系统，可以成功实现胞内表达或是分泌表达，且其放大培养基相对廉价，培养条件要求不高，适宜工业放大。
| 酵母蛋白表达服务标准型套餐 | |||
| 实验项目 | 实验内容 | 交付结果 | 服务周期 |
| 1.原核克隆 | 基因的获得 | 核酸电泳图片 | 2周 |
| PCR扩增产物酶切连接到合适的载体 | |||
| 转化DH5α | |||
| 重组质粒大量制备 | |||
| 线性化重组质粒 | |||
| 2.优化表达 | 电转化适宜的酵母宿主 | 酵母核酸电泳图 | 5-6周 |
| 用遗传霉素G418进行多拷贝子筛选 | |||
| 对多拷贝子克隆进行RCR鉴定 | |||
| 选取40株多拷贝子进行小量诱导表达 | 最终种子表达上清 SDS-PAGE图 |
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| 3.表达及纯化 | 选取表达情况最好的，根据客户需要放大表达 | 表达上清SDS-PAGE | 1-2周 |
| 发酵液上清处理及一步纯化 | 最终纯化产物SDS-PAGE 及western blot |
||
| 纯化产物SDS-PAGE及western blot | 客户要求的蛋白表达量 | ||
杆状病毒-昆虫细胞表达系统：http://www.biomart.cn/infosupply/16376049.htm
——凭借其简易的流程、高表达水平及翻译后的修饰功能，可在短时间内制备大规模翻译后修饰的蛋白，被广泛应用于病毒疫苗开发（如流感病毒和HPV疫苗开发）、信号蛋白制备、细胞因子制备等。
| 昆虫细胞蛋白表达套餐 | |||
| 实验项目 | 实验流程 | 交付内容 | 时间 |
| 1.获得重组供体质粒 | ●基因的获得 | 核酸电泳图片 | 2周 |
| ●PCR扩增产物酶切连接到本公司改造过的pFastBac载体上 ●转化E.coliDH10β |
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| ●获得测序正确的重组质粒 | |||
| 2.病毒扩大化培养 | ●构建重组杆状病毒质粒 ●重组杆状病毒质粒转染昆虫细胞 ●获得高滴度的病毒贮液 |
重组杆状病毒质粒电泳图片 高滴度的病毒贮液 |
3-4周 |
| 3.优化表达 | ●高滴度的病毒贮液再次感染昆虫细胞 ●表达产物SDS-PAGE电泳及western blot检测 |
SDS-PAGE电泳图及western blot分析 | 1.5周 |
| 4.蛋白表达及纯化 | ●1L昆虫细胞表达体系及蛋白的纯化 | 已纯化的蛋白QC报告 |
1-2周 |
哺乳动物细胞表达系统：http://www.biomart.cn/infosupply/16376059.htm
——能够指导蛋白的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子，在重组蛋白药物和诊断原料试剂盒的开发及应用方面倍受青睐。
| 哺乳动物细胞瞬时转染表达 | |||
| 实验项目 | 实验流程 | 交付内容 | 时间 |
| 1.原核克隆 | 基因的获得 | 核酸电泳图片 | 2周 |
| 载体的构建 | |||
| 质粒的转化 | |||
| 质粒的大量制备 | |||
| 2.瞬时转染表达 | 细胞传代，待细胞密度达70%~80%，进行转染； | 细胞转染总体积 | 3-4个工作日 |
| 48~72小时收获细胞 | |||
| 3.蛋白表达与纯化 | 通过western blot 检测 | western blot印记 | 4周 |
| 纯化表达产物 | 1L上清的纯化产物 | ||
| 哺乳动物细胞稳定转染表达 | |||
| 实验项目 | 实验流程 | 交付内容 | 时间 |
| 1.原核克隆 | 基因的获得 | 核酸电泳图片 | 2周 |
| 载体的构建 | |||
| 质粒的转化 | |||
| 质粒的大量制备 | |||
| 2.稳定转染表达 | 瞬时转染后用抗生素筛选，建立稳定表达细胞系 | 稳定表达的细胞株 | 1~2个月 |
| 3.蛋白表达与纯化 | 通过western blot 检测 | western blot印记 | 2周 |
| 纯化表达产物 | 1L上清的纯化产物 | ||
更多产品请见公司主页：http://www.cusabio.cn/
详情请咨询：86-27-87582341 86-27-87196173
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