DNA与蛋白相互作用研究

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服务名称 :天津赛尔生物

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DNA与蛋白相互作用研究

DNA与蛋白相互作用研究:赛尔生物能够提供完整的DNA与蛋白相互作用研究的三大技术平台:酵母单杂交技术,EMSA凝胶迁移实验,染色质免疫共沉淀。让您的DNA与蛋白相互作用研究变的简单,轻松……

一 酵母单杂交技术
1:基本原理
将已知顺式作用元件构建到最基本启动子(minimal promoter,Pmin)的上游,把报告基因连接到Pmin下游。将编码待测转录因子cDNA与已知酵母转录激活结构域(transcription-activating domain, AD)融合表达载体导入酵母细胞,该基因产物如果能够与顺式作用元件相结合,就能激活Pmin启动子,使报告基因得到表达。



2:赛尔生物使用的酵母单杂交系统为Clonthech MATCHMAKER One-Hybrid System (PT1031-1)
3:客户提供:⑴需要研究的顺式作用元件序列⑵cDNA文库或由赛尔生物代为制备
4:赛尔交付: ⑴构建的含有2-3个串联顺式作用元件序列的报告质粒⑵报告质粒泄露表达检测(3)转染AD-fusion 文库后,b-galactosidase 筛选结果(4)阳性克隆测序结果(5)主要仪器,试剂说明及实验报告



二 EMSA凝胶迁移实验
1:基本原理
是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术。这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合体在PAGE中有不同迁移率的原理。当核转录因子与一条人工合成的特异的DNA或RNA结合后,其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA,从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。
2:赛尔生物使用的EMSA 试剂盒为Pierce公司的LightShift Chemiluminescent EMSA Kit(pierce No.20148)
3:客户提供:⑴EMSA所用细胞⑵处理因素及相关文献
4:赛尔提供及交付:⑴标记探针⑵阳性对照结果(3)实验结果(4)主要仪器,试剂说明及实验报告

三 染色质免疫沉淀(ChIP)
1:基本原理:在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,利用抗原抗体的特异性识别反应,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。
2:赛尔生物使用的ChIP试剂盒为Millipore公司提供的EZ-ChIP Kit (Catalog #17-371)
3:客户提供:⑴研究用细胞或组织 ⑵检测的指标(3)相关文献
4:赛尔提供及交付:⑴阳性对照结果⑵实验结果(3)主要仪器,试剂说明及实验报告


赛尔生物相关服务:
MicroRNA相关服务siRNA干扰课题整体外包服务基因克隆服务慢病毒包装服务腺病毒服务稳定细胞株筛选服务蛋白表达服务抗体制备服务DNA与蛋白相互作用研究噬菌体展示技术服务cDNA文库构建干细胞研究基金申请,标书撰写,专利申请,课题设计等

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