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服务名称 :酵母表达系统服务
提供商 :cusabio
武汉华美生物工程有限公司蛋白平台在重组蛋白表达、纯化、包涵体复性、天然蛋白提取方面拥有完备先进的设备、丰富的经验。现已通过原核和真核表达系统、以及表达载体的优选,结合众多纯化方式获得了数十个种属的上千种高质量的重组蛋白,提取天然蛋白百余种。我们生产的众多蛋白已成功应用于蛋白结构研究、细胞功能试验、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发等众多领域,深受全世界顾客的好评。拥有四大表达系统:
大肠杆菌表达系统:http://www.biomart.cn/infosupply/16376041.htm
酵母表达系统:http://www.biomart.cn/infosupply/16376047.htm
杆状病毒-昆虫细胞表达系统:http://www.biomart.cn/infosupply/16376049.htm
哺乳动物细胞表达系统:http://www.biomart.cn/infosupply/16376059.htm
更多产品请见公司主页:http://www.cusabio.cn/
详情请咨询:86-27-87582341 86-27-87196173
酵母蛋白表达系统是一种最经济高效的真核蛋白表达系统,可以成功实现胞内表达或是分泌表达,且其放大培养基相对廉价,培养条件要求不高,适宜工业放大。与哺乳动物细胞表达系统一样,酵母蛋白表达系统能够对所表达蛋白进行例如糖基化、酰基化、脂基化、磷酸基化等保证蛋白天然构象的修饰,可用于制备非常接近天然蛋白的具有高附加值的蛋白原料。
武汉华美生物工程有限公司的酵母蛋白表达平台由多年从事酵母表达操作的实验人员组成,经验丰富,采用自行改造的高效分泌载体和宿主组合,可在最大程度上实现最高质量的蛋白表达。经客户反馈,以我平台所制备的蛋白原料为抗原所制备的单抗均具有很好的识别天然蛋白的优良特性。
我们的优势:
- 专利的Biobrick技术,可以实现高效体外构建任意拷贝的基因剂量,实现表达量的提高,可成功用于工业菌种的改良优化。
- 采用自行改造的高效分泌载体:pPIC9K、pPIC9K高效融合载体、pPICZA、pGAPZa、pPaSUMO3,宿主GS115、KM71、X33的正交组合。PINK系统优化分泌表达信号肽。胞内表达采用自行改造的载体pPIC 3.5k载体和宿主GS115、KM71、X33的组合,可在最大程度上实现表达。
- 高效的种子筛选工作能使您所定制的蛋白在最短的时间内获得尽可能高的产量。
服务内容
酵母蛋白表达服务经济型套餐 | |||
实验项目 | 实验内容 | 交付结果 | 服务周期 |
1.原核克隆 | 基因的获得 | 核酸电泳图片 | 2周 |
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体 | |||
转化DH5α | |||
重组质粒大量制备 | |||
线性化重组质粒 | |||
2.优化表达 | 电转化适宜的酵母宿主 | 酵母核酸电泳图 | 2-3周 |
从转化的平板上随机挑10株单菌落做PCR鉴定 | |||
3.表达及纯化 | 从PCR鉴定阳性菌落中选取一株做1L体系的放大表达 | 表达上清SDS-PAGE | 1-2周 |
发酵液上清处理及一步纯化 | 最终纯化产物SDS-PAGE 及western blot |
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纯化产物SDS-PAGE及western blot | 1L上清的纯化产物 |
酵母蛋白表达服务标准型套餐 | |||
实验项目 | 实验内容 | 交付结果 | 服务周期 |
1.原核克隆 | 基因的获得 | 核酸电泳图片 | 2周 |
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体 | |||
转化DH5α | |||
重组质粒大量制备 | |||
线性化重组质粒 | |||
2.优化表达 | 电转化适宜的酵母宿主 | 酵母核酸电泳图 | 5-6周 |
用遗传霉素G418进行多拷贝子筛选 | |||
对多拷贝子克隆进行RCR鉴定 | |||
选取40株多拷贝子进行小量诱导表达 | 最终种子表达上清 SDS-PAGE图 |
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3.表达及纯化 | 选取表达情况最好的,根据客户需要放大表达 | 表达上清SDS-PAGE | 1-2周 |
发酵液上清处理及一步纯化 | 最终纯化产物SDS-PAGE 及western blot |
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纯化产物SDS-PAGE及western blot | 客户要求的蛋白表达量 |
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