鼠尾胶原蛋白Ⅰ型

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型

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品牌:晶欣

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货号 :C5062

保存条件 : 2-8度

供应商 :广州威佳科技

数量 :大量

英文名 :rattailtendon collagen type I

保质期 :2年

规格 :10ml

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明
货号:C8062
保存:4℃保存,切勿冻存,有效期为一年。
规格:10mg, 5mg/ml, 溶解于 0.006mol/L HAc, 无菌。
产品简介:
晶欣鼠尾胶原蛋白 I型(rattailtendon collagen type I)是通过 Birkedal-Hansen的方法,通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。本公司鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真实的生长环境,使细胞在三维环境中生长。
1,在使用晶欣鼠胶原蛋白I型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。
2,在 1mg/ml浓度以上,pH为7左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到NIH-3T3细胞在三维胶内正常生长、PC-12细胞在三维胶表面正常生长。
使用方法:
1、细胞培养器皿的表面包被推荐浓度: 1-5ug/cm2
以包被浓度为 2 ug/cm2 为例:用无菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/ml。
按以下表格体积加到相应的培养器皿中:
表面积(cm2 ,每孔或每皿)
加入 0.012mg/ml 胶原的体积( ul )
96孔细胞培养板
0.3
50
24孔细胞培养板
1.9
300
12孔细胞培养板
3.8
600
6孔细胞培养板
9.5
1580
35mm细胞培养皿
8
1330
60mm细胞培养皿
21
3500
100mm细胞培养皿
55
9170
确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面,开盖在超净台上过夜晾干。也可以在室温放置 1小时后,用PBS洗3-4次后直接使用。包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3个月以上的时间。
2、三维胶原的制备
鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上,pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,在成胶过程中需要加入0.06×体积的0.1mol/L NaOH 来中和。
需要的溶液(均需要无菌、预冷):10×PBS(可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示)或 10×培养液,, 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L 乙酸(一般不用),双蒸水
A.不含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12ul 0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100ul 10×PBS
或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。
B.含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反过来把12ul 0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul 10×PBS或10×培养液,混匀(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。
注意事项:
鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。

广州威佳科技有限公司:www.whiga.com.cn/
  • 联系人:陈小姐 /李先生电话:020-84224925
  • 邮件:WHIGA22@126.COM
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  • 地址:广州广州大道南448号财智大厦1808室

货号 :C5062

保存条件 : 2-8度

供应商 :广州威佳科技

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英文名 :rattailtendon collagen type I

保质期 :2年

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