总外泌体捕获和定量试剂盒说明书（尿液）

外泌体提取和纯化是外泌体研究的第一步，接下来，除了外泌体鉴定外，外泌体定量也是下游实验前的重要一环。目前，外泌体定量主要通过NTA（纳米颗粒追踪实验）来实现，应用较多，即通过溶液中颗粒的光散射来测定颗粒的浓度和不同粒径分布，但不能区分外泌体和微囊泡与其它颗粒的区别，可以通过外泌体和微囊泡质膜染色，通过荧光NTA（fNTA）能够准确测定溶液中外泌体的浓度；另外，也可以通过流式细胞仪测定外泌体浓度等，这些方法操作复杂，成本较高，需要昂贵的仪器设备。外泌体ELISA（EXO-ELISA），即外泌体捕获和定量试剂盒，采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验（ELISA）技术，酶标板预包被有抗外泌体表面抗原的抗体，可直接捕获样品和标准品中外泌体颗粒，然后加入Biotin标记的检测抗体，洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素（Streptavidin-HRP），洗涤后，加入显色底物液TMB，避光显色。
EXO-ELISA，可简单、快速捕获和分离特异的的总外泌体或外泌体亚群，并且通过外泌体标准品，可测定样本中外泌体的浓度；使用较为方便，既可以检测同一样本中外泌体多个蛋白质的表达，又可以筛选大量样本中某一蛋白质的表达变化。

1、使用灵活、方便，不需要额外的昂贵仪器设备。
2、可直接使用，不需要外泌体预分离和纯化（超速离心或其它方法）。
3、很容易操作，结果重复性好。
4、只需要小体积样本（100μl/孔）。