pFN18K (HaloTag® 7) T7 Flexi® Vector，20µg

英文名 ：pFN18K (HaloTag® 7) T7 Flexi® Vector

供应商 ：普洛麦格

规格 ：20µg

pFN18K (HaloTag® 7) T7 Flexi® Vector，20µg
说明：
HaloTag® Protein Purification System (HaloTag® 蛋白纯化系统 )被设计用于纯化 HaloTag® 融合蛋白， HaloTag® 是一种新型蛋白标签，能够增强重组蛋白的表达产率和可溶性。 HaloTag® 技术能够将目的蛋白以共价结合的形式、高效并特异地捕获到 HaloLinkTM 树脂上，因此克服了其它使用亲和标签进行蛋白纯化的方法所带来的、基于平衡反应的限制因素 ( 例如，低水平表达蛋白的低效捕获和冲洗纯化树脂导致的蛋白流失 )。可利用 HaloTag® 技术快速、方便地检测 HaloTag® 融合蛋白，也可监测 HaloLinkTM 树脂对蛋白的固定化效率，这是通过使用 HaloTag® TMR 荧光配基进行标记，然后再进行 SDS-PAGE 而实现的。实验指南可在下述技术手册中找到： HaloLinkTM Resin 技术手册 #TM250, HaloLinkTM Protein Array 技术手册 #TM310, 和HaloCHIPTM System 技术手册 #TM075。实验过程概述HaloTag® 蛋白是一个 34kDa 的突变水解酶，通过一个被固化的氯化烷配基HaloLinkTM 树脂发生共价结合。 TEV 蛋白酶可从HaloLinkTM 树脂上将目的蛋白切下。 TEV 蛋白酶具有一个 N 端 HQ标签，可以使用 HisLinkTM 树脂与目的蛋白分离开，这样就得到了纯化的目的蛋白。编码 HaloTag® 蛋白并能够在大肠杆菌中使目的蛋白达到最优表达的最适载体是 pFN18A HaloTag® T7 Flexi® Vector(G2751) 和 pFN18K HaloTag® T7 Flexi® Vector (G2681)。这些载体可以单独购买。
特点：
• 与 His-Tag, GST 和 MBP 亲和标签相比较，本系统产量大、纯度高、能够获得具有功能的可溶性蛋白： HaloLinkTM 树脂以共价结合的方式捕获和固定 HaloTag® 融合蛋白，特异性高。
• 在原核、哺乳动物细胞和无细胞表达系统中，目的蛋白的表达得到增强： 蛋白以 HaloTag® 融合蛋白的形式表达。
• 纯化表达量少的融合蛋白： HaloLinkTM 树脂能快速、特异性地以共价结合的方式捕获 HaloTag® 蛋白，这是一个非平衡过程。
• 使用 TEV 蛋白酶剪切，可高效回收目的蛋白： TEV 蛋白酶剪切HaloTag® 蛋白和目的蛋白之间的连接肽段，其识别位点已经经过优化。由于是共价连接， HaloTag® 蛋白仍固定在树脂上。
• 节省时间： 仅使用一种与下游应用兼容的缓冲液，即可支持所有的纯化步骤。
• 使用 HaloTag® 荧光配基可轻松实现凝胶内检测和蛋白表达水平的定量： HaloTag® 蛋白 - 配基相互作用非常稳定，可以在含有SDS 的样品缓冲液中煮沸，并直接使用 SDS-PAGE 分离。
储存条件： 将 HaloLinkTM 树脂和 HisLinkTM 树脂储存于 4℃。不要将树脂冷冻。将 TEV 蛋白酶储存于 –20℃。