GloSensor™ cAMP Reagent,250mg

GloSensor™ cAMP Reagent,250mg

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品牌:promega 品牌认证

货号:E1291

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供应商 :普洛麦格

英文名 :GloSensor™ cAMP Reagent

规格 :250mg

GloSensor™ cAMP Reagent,250mg
明:
GloSensorTM cAMP Assay 采用了一种全新的方法来检测活细胞内 cAMP 的水平。 cAMP 是参与 GPCR 信号转导的一种重要的二级信使,通过 Gα-s Gα-i 蛋白产生作用。这个新的试剂盒基于GloSensorTM 技术,该技术将萤火虫萤光素酶经过遗传改造,插入了一个结合 cAMP 的蛋白组分。当结合上 cAMP 后,萤光素酶构象发生改变,导致光输出的增加。这种活细胞检测在利用 cAMP 进行信号转导动力学和调控等研究方面表现出众。将目的受体和该生物传感器在选定的细胞系中进行瞬时表达时,研究者可使用 GloSensorTM cAMP 检测试剂盒进行检测。此外,还可以创造出同时被生物传感器和目的受体基因转染的稳定细胞系。操作过程很简单:用 GloSensorTM cAMP Reagent (GloSensorTM cAMP试剂 ) 预平衡细胞大约 2 小时;然后用特定的激动剂 / 拮抗剂或者未
知活性的化合物处理细胞, 10-30 分钟后检测发光。无需其它加样步骤或者操作过程。几乎任何带有自动进样器的发光检测仪都能进行有效检测,比如 GloMax® 系列发光检测仪。 GloSensorTM cAMP 试剂要求在 GloSensorTM Limited Use Label License (GloSensorTM 有限使用标签许可证书 ) 指导下使用。选择合适的质粒:我们提供了生物传感器的两种变体。在多数实验中,我们建议首
pGloSensorTM-22F cAMP 质粒。pGloSensorTM-22F cAMP 质粒: pGloSensorTM-20F cAMP
质粒相比,用该质粒进行体外无细胞表达得到的生物传感器,在cAMP 饱和时活化 EC50 及信噪比得到增强。而在活细胞中,这两种质粒表现出的性能基本类似。pGloSensorTM-20F cAMP 质粒: 该质粒编码的生物传感器可在37℃下的 HEK293 细胞中表现出良好的性能;而 pGloSensorTM-22F
cAMP 质粒所发出的萤光在生理温度下更难检测。关于这两种质粒基本性能差异的更深入解释,请参阅 TechnicalManual (#TM076) 的第 3.B 节——GloSensorTM质粒的选择建议。
特点:
同类产品中性能最佳: Z' 值及高信号;背景比值非常适用于HTS/uHTS;高达 1,000 倍的光输出变化。
无需裂解的活细胞检测模式: 0 步骤检测”极大地方便了 HTS/uHTS;对活细胞内的 cAMP 的方便监测为受体生物学提供了更为完整的分析手段。
高灵敏度及增加的生物相关性: 方便检测低丰度内源受体;直接检测 Gi- 偶联受体的活性及未加入毛喉萜 (forskolin) 时反相激动剂的活性。无需加入 PDE 抑制剂。
储存条件: pGloSensorTM cAMP Plasmid 储存于 -20℃,将GloSensorTM cAMP Reagent 储存于 -70℃。将重悬的 GloSensorTMcAMP Reagent 分成单次使用的小份, 储存于 -70℃。

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