产品详情
文献和实验
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品系 :人源细胞系
ATCC Number :详询
细胞类型 :贴壁生长
肿瘤类型 :详询
供应商 :厦门逸漠生物科技有限公司
库存 :999
注册证号 :详询
英文名 :HUVSMC
生长状态 :正常
年限 :长期
运输方式 :复苏发货或干冰发货(顺丰快递)
器官来源 :详询
是否是肿瘤细胞 :详询
细胞形态 :上皮细胞样
免疫类型 :详询
物种来源 :详询
相关疾病 :详询
组织来源 :人脐带
规格 :1*10^6
产品基本信息
细胞名称:HUVSMC,人脐静脉平滑肌细胞永生化
种属来源:人
组织来源:脐带
细胞形态:内皮细胞样
生长特性:贴壁生长
培养基::平滑肌细胞培养体系
生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代方法:1:2至1:3,每周2-3次
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
支原体检测:无
细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有1 mLHUVSMC细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有HUVSMC细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果HUVSMC细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加入0.25%Trypsin-0.02% EDTA消化液于培养瓶中(T25瓶1-2ml,T75瓶2-3ml),使消化液浸润所有HUVSMC细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加3-4ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将HUVSMC细胞悬液按1:2比例分到新的含6-8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使HUVSMC细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
厦门逸漠生物科技有限公司
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