TRAP染色试剂盒-50T

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产品名称：TRAP染色试剂盒

产品概述：

酸性磷酸酶又称酸性磷酸单酯酶，简称ACP。此酶在酸性条件下催化醇和酚类磷酸酯的水解。酸性磷酸酶广泛分布于机体各组织中，它主要位于溶酶体内。抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）是破骨细胞的特异性标志磷酸酶，通常作为鉴别破骨细胞的重要标志物。抗酒石酸酸性磷酸酶染色,又称TRAP染色，是用于检测破骨细胞的染色。抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）在含有酒石酸的酸性条件下将AS-BI磷酸盐水解为萘酚AS-BI，与显色剂结合，在酶活性部位形成酒红色沉淀。

保证信息：

注意事项：

操作流程：

1. 石蜡切片脱蜡至水：切片依次经二甲苯15 min，更换新鲜的二甲苯15 min，无水乙醇5min，新鲜无水乙醇5 min，90%乙醇1 min，80%乙醇1 min ，70%乙醇1min，蒸馏水水洗3次，每次5min。

2. 切片上滴加蒸馏水将组织完全覆盖，放置于湿盒中，37℃孵育2h。

3. TRAP染色工作液的配置：

（1）将副品红溶液与NaNO₂溶液按照1:1的比例进行混合。

（2）向第（1）步混合均匀的溶液中加入等量的AS-BI磷酸盐溶液，充分混匀。

（3）将第（2）步的混合溶液与TRAP反应缓冲液按照1:9的比例进行混合，充分混匀。

（4）将第（3）步的混合液进行过滤，即为 TRAP染色工作液。

4. 切片孵育完成后，去掉组织上的蒸馏水，滴加TRAP染色工作液，避光37℃孵育30min。

5. 去掉组织上的TRAP染色工作液 ，用蒸馏水洗2次，每次5min。

6. 核复染：切片入核染液染色1-2 min（可以根据染色结果及要求进行时间调整），蒸馏水洗，分化液分化1-2s， 自来水返蓝。

7. 切片入无水乙醇脱水5 min，更换新的无水乙醇再脱水5 min，经二甲苯透明5 min，更换新鲜的二甲苯再透明5 min。滴加中性树胶封片。

结果解读：破骨细胞周围或胞浆部分呈现酒红色，细胞核为蓝紫色。