人附睾成纤维细胞价格_品牌:西格-丁香通官网

ATCC Number ：人附睾成纤维细胞

供应商：上海西格

库存：28

英文名：人附睾成纤维细胞

生长状态：贴壁

细胞形态：上皮样，多角形细胞

物种来源：人

组织来源：附睾组织

规格：5×105

人附睾成纤维细胞

商品属性：

产品名称	规格	货号
人附睾成纤维细胞	5×105	XG-X4590

一、细胞基本属性

组织来源	附睾组织
种属来源	人
产品规格	5×10⁵cells/T25细胞培养瓶
细胞简介	附睾是一个多数曲折、细小的管子构成的器官，一面连接着输精管，一面连接着睾丸的曲细精管。当精子离开睾丸时，就跑到附睾里，继续生长成熟。附睾管除贮存精子外还能分泌附睾液，其中含有某些激素、酶和特异的营养物质，它们有助于精子的成熟。附睾管由黏膜、肌层和外膜组成。其中，外膜层主要是由成纤维细胞构成。
包被条件
培养基	原代成纤维细胞培养体系
换液频率	每2-3天换液一次
生长特性	贴壁培养
细胞形态	上皮样，多角形细胞
传代特性	细胞特性确定传代
传代比例
消化液	0.25%胰蛋白酶
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：
质量检测：实验室分离的人附睾成纤维细胞经波形蛋白(Vimentin) 免疫荧光染色为阳性，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、 HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
人附睾成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
人附睾成纤维细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈上皮样，多角形细胞，在技术部标准操作流程下，细胞不建议传代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
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四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。