小鼠胰腺星状细胞

小鼠胰腺星状细胞

价格: ¥4650

品牌:西格

货号:XG-X5062

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ATCC Number :小鼠胰腺星状细胞

供应商 :上海西格

库存 :35

英文名 :小鼠胰腺星状细胞

生长状态 :贴壁

细胞形态 :成纤维细胞样

物种来源 :小鼠

组织来源 :胰腺组织

规格 :5×105

小鼠胰腺星状细胞
商品属性:
产品名称 规格 货号
小鼠胰腺星状细胞 5×105 XG-X5062
一、细胞基本属性
组织来源 胰腺组织
种属来源 小鼠
产品规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
细胞简介 小鼠胰腺星状细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌生长抑素,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。纤维化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星状细胞(PSC)是胰腺纤维化的主要效应细胞,PSC分离和成功培养是体外研究胰腺纤维化的重要前提。未活性化的PSC胞浆中富含维A脂滴,并表达Desmin蛋白,活化后的PSC则表达α-平滑肌肌动蛋白(alpha-SMA)。PSC具有静息态与激活态两种,并分别具有特异的标志物。静息状态PSC胞质内富含的维生素A脂滴可以被油红O染成红色,阳性表达Desmin。激活状态PSC阳性表达alpha-SMA。油红O染色发现,原代分离的细胞培养6d,胞浆中仍可见明显的脂滴,传代后,橙红色的脂滴颗粒显著减少甚至消失。免疫细胞化学染色显示,细胞接种24h仍然表达Desmin,48h后Desmin基本不再表达。培养48h后绝大多数细胞开始表达alpha-SMA,随着培养时间的增长和传代次数的增加,细胞表达alpha-SMA,而不再表达Desmin,说明细胞活化。提示PSC接种24h后即启动了激活过程,至培养第6d大多数细胞激活,传代后细胞处于高度激活状态。原代胰腺星状细胞可作为慢性胰腺炎新药的细胞筛选模型,目前研究发现:胰腺受损时,在各种刺激因子作用下使胰腺星状细胞活化,导致细胞形态、功能发生变化,促使基质增生、胶原蛋白的大量生成及不规则沉积。
包被条件  
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右
传代比例  
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介:实验室分离的小鼠胰腺星状细胞采用胶原酶制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:实验室分离的小鼠胰腺星状细胞经α-SMA、Desmin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
小鼠胰腺星状细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。


二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
小鼠胰腺星状细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在技术部标准操作流程下,可传3-5代左右;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。 
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