人Toll样受体4ELISA试剂盒

供应商 ：抚生实业

库存 ：60

样本 ：Human Toll-like receptor 4 ELISA Kit,Toll-like receptor 4,TLR4

标记物 ：免疫学检验，血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本。

适应物种 ： 人，大鼠，小鼠，鸡鸭鹅，鱼等

应用 ：ELISA，酶联免疫吸附测定，双抗夹心法

检测方法 ：竞争法、夹心法、间接法

检测限 ：0.75ng/mL~24ng/mL

规格 ：48T/96T

公司销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗，仅可用于工业或科研等非医疗目的。
工作原理:
本试剂盒采用的是竞争法酶联免疫吸附检测技术（ELISA）。测定样品中人Toll样受体4水平。向预先包被了人Toll样受体4抗原的酶标孔中，加入标准品和样本，温育后，加入生物素标记的人Toll样受体4抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入显色底物TMB，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。最后，在450 nm处测定反应孔样品吸光度（OD）值，样本中的人Toll样受体4浓度与OD值成反比，通过绘制标准曲线计算出样本中人Toll样受体4的浓度。

产品名称	人Toll样受体4ELISA试剂盒	储存条件	2-8℃，避光防潮保存
货号	A126830	检测范围	0.75ng/mL~24ng/mL
最低检测限	0.1	特色服务	免费代测

样本处理及要求：
1. 组织标本：对于样本要求保持鲜重，称取样本中的重量不小于50mg，一般以1g为基准,但不严格要求固定样本每个重量必须达到相同的水平。匀浆的比例选取10%，相当于1g组织加9ml的匀浆液来进行匀浆。匀浆液选取PBS（PH=7.2-7.4，浓度为0.01mol/L）。匀浆过程选用组织匀浆器，冰浴上匀浆。(或者进行液氮碾磨)，离心取上清，离心转速选用5000转每分，时间是15分钟。取上清液待检。
2. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
3. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
ELISA试剂盒的组成：

操作步骤：
1. 标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。
4. 温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
7. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 
8. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
9. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值），测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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