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文献和实验
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库存 :大量
英文名 :PCDH-EF1a-COGFP-PURO-SFFV-MCS-WPRE
CAS号 :000011
保质期 :1年
供应商 :上海瓦兰生物
保存条件 :-20°
规格 :20ul
MIF对照组质粒,PCDH-EF1a-COGFP-PURO-SFFV-MCS-WPRE
规格:20ul
慢病毒感染预实验:
1确定抗生素筛选的使用浓度
根据实验目的及实验需要, 如需要对感染病毒的细胞进行筛选, 需要确定该细胞适用的抗生素浓度。 常用的真核抗性有:瞟岭霉素、 潮霉素B、 杀稻瘟菌素及遗传霉素。 下表为常用的真核抗性及其筛选周期及一般工作浓度。
a) DayO:将细胞铺至24孔板, 根据不同细胞的生长速度, 控制细胞接种量使得次日细胞密度 达到 80%左右。
b} Day1:加入不同浓度的抗生素{此处以瞟岭霉素为例) :
0 µg/ml
0.5 µg/ml
1 µg/ml
1.5 µg/ml
2 µg/ml
2.5 µg/ml
3 µg/ml
3.5 µg/ml
4 µg/ml
4.5 µg/ml
5 µg/ml
5.5 µg/ml
6 µg/ml
6.5 µg/ml
7 µg/ml
7.5 µg/ml
8 µg/ml
8.5 µg/ml
9 µg/ml
9.5 µg/ml
10 µg/ml
c) Day3加入抗生素48h后, 显微镜观察细胞状态:将全部细胞杀死的最低浓度即为该细胞适用的抗生素工作浓度。
注意事项1:抗生素筛选时建议每天更换新的培养基并加入抗生素。
注意事项2:抗生素筛选时严格控制细胞密度, 细胞汇合度不能超过100%。
上海瓦兰生物科技有限公司
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