HPV16E7-HA对照组质粒,Lenti-SFFV-IRES-PURO-WPRE

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品牌：wksubio

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英文名：Lenti-SFFV-IRES-PURO-WPRE

CAS号：00009

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规格：20ul

HPV16E7-HA对照组质粒，Lenti-SFFV-IRES-PURO-WPRE

规格：20ul
如何提高感染效率？

通过提高MOJ值来提高慢病毒的转染效率，也可以通过适当提高转染辅助试剂（如Polyb『ene）的工作浓度来提高病

毒的转染效率。当采取以上方法时，需观察细胞状态，一旦细胞状态变差，需要更换为新鲜的完全培养基继续培养。一般来讲，状态良好的细胞也可以获得较状态差的细胞更高的转染效率。慢病毒感暴后，一般多长时间观察转染效率一般来讲，对于代谢较快的细胞，如293T细胞，病毒感染后48-72h目的基因的表达量达到高峰；对于代谢较慢的细胞，如原代细胞、神经细胞等，病毒感染后需要96h甚至更长时间目的基因的表达量才能达到高峰。加入病毒后，细胞死亡很多，如何处理？

若病毒感染后，细胞死亡很多，首先考虑慢病毒对该细胞毒性较大，请调整并减少病毒用量，并在感染后4-Bh及时对细胞进行换液。

感染悬浮细胞

a）感染当天，将对数生长期的状态良好的悬浮细胞收集，根据需要的细胞量分装于1.5ml离心管中并离心收集。

b）用100-200 µ L含有合适浓度｛一般为8 µg/ml ) Polybrene的无血清培养基重悬细胞沉淀。

c）取出病毒子冰上解冻。根据MOJ及病毒滴度加入相应的病毒量，可先用无血清培养基稀释；若需要稀释病毒，则上

一步重悬细胞沉淀时需要考虑稀释病毒的体积。

d）加入病毒后轻柔吹打混匀。将1.5ml离心管放于37℃培养箱中孵育30mino

e）将管中混合液吸出加到培养器皿中，加入足量新鲜的完全培养基。

f）感染后12h更换培养基。

g）感染72-96h后观察细胞阳性率。

注：以上为病毒感染悬浮细胞的一锻方法，但悬浮细胞较贴壁细胞更难感染，因此如有必要，可采用离心感染方法提

高感染效率。将细胞接种至培养器皿中，加入适量的病毒后，将培养器皿密封，用平角转子离心机1000g离心1h，再放会